Титр впч в пцр

Титр впч в пцр thumbnail

Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения.

Готовый анализ на ВПЧ выглядит в виде бланка, на котором указываются:

  • Дата исследования. Она очень важна, поскольку концентрация ВПЧ часто оценивается в динамике. В этом случае самым важным фактором является рост концентрации вируса. Быстрое увеличение уровня ВПЧ гораздо опаснее слегка его повышенной концентрации, сохраняющейся в течение длительного времени. Поэтому результаты анализа надо сохранить.
  • Номер пробирки, присваиваемый каждому образцу, поступающему в лабораторию.
  • ФИО пациента и его пол.
  • Данные врача и лаборатории, проводившей исследование.

Результат анализа выдается в виде таблицы, где указывается абсолютная и относительная концентрация каждого из вирусов и общая вирусная нагрузка. В нём обязательно указывается концентрация вирусов штаммов 16, 18 и 31, чаще всего вызывающих рак шейки матки, и остальных, которые предусмотрены данным методом исследования.

Пример бланка с результатами анализов на папилломавирус

Бланк анализа на ВПЧ

Абсолютная вирусная нагрузка – это количество вируса обнаруженного в образце. Если ВПЧ отсутствует или его концентрация не превышает клинически значимую, в бланке ставится пометка «вирус отсутствует» или «не обнаружен». Такая запись не означает, что возбудителя вообще нет в организме. Это маловероятно, поскольку папилломавирус встречается у 80% населения. Просто его концентрация недостаточна для развития рака шейки матки и других заболеваний.

Если абсолютное содержание ВПЧ превышает клинически значимое, напротив штамма вируса указывается его концентрация (вирусная нагрузка). Чем она выше, чем хуже результат.

Абсолютная вирусная нагрузка ВПЧ при поражениях шейки матки разной тяжести, копий/мл (геном-эквивалентов на 105 клеток эпителия человека). Таблица результатов

Вирусная нагрузкаПоражение шейки маткиПоказатель Lg (абсолютных копий) ВПЧ/10 5 клеток
Клинически малозначимаяот 103 до 105< 3
Умеренная105–1073 – 5
ВысокаяБолее 107Более 5

Чем выше концентрация вирусов в мазке, тем существеннее риск возникновения болезней вызываемых папилломавирусом – злокачественных опухолей, бородавок, кондилом, папиллом, папилломатоза дыхательных путей.

В бланке указывается показатель КВМ – контроль взятия материала, характеризующий его качество. Нормальный показатель КВМ должен быть не менее 4. Его уменьшение говорит о нехватке нормального объема ДНК, необходимого для проведения исследования. При низком КВМ проводится повторное взятие материала.

Относительная нагрузка – отношение вирусной нагрузки к КВМ. Результат расшифровки показателя таблицы

Относительная нагрузкаРасшифровка
«Не выявлено».Вирус в организме не обнаружен или его концентрация невелика
Отрицательный показательКоличество вирусов гораздо меньше числа здоровых клеток. Возбудитель находится в «спящем» состоянии или его концентрация снижается
Положительный показательРаспространение инфекции или ее рецидив (возврат) после лечения. Это плохой результат анализа ВПЧ

Общая вирусная нагрузка важна в случае, если имеется поражение несколькими возбудителями. Для подсчета суммируют все имеющиеся вирусные показатели.

По расшифровке результатов анализа, в котором выявлены те или иные типы ВПЧ, можно выявить, какое именно заболевание грозит пациенту.

Таблица расшифровки анализа на ВПЧ с вероятным диагнозом

Заболевания Штамм ВПЧ
Различные типы бородавок – обычные (вульгарные), юношеские (плоские), подошвенные (шипицы)1-4, 10, 26, 27 – 29, 49, 57
Бородавки мясников (крупные бородавчатые наросты на теле)7
Верруциформная эпидермодисплазия – заболевание, сопровождающееся появлением грубых толстых наростов на лице, теле и конечностях, напоминающих кору дерева2, 3, 5, 8-10-12, 14, 15, 18- 20, 36, 37, 46, 47, 50
Кондиломы (генитальные бородавки)6, 11, 16, 18, 33, 39, 40, 42-43, 51-52 54-55, 57, 61-62, 64-67
Дисплазия и рак шейки матки. Злокачественные опухоли анального канала прямой кишки6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39-40, 42-43, 45, 50 – 52, 54-56 ,61- 62, 64, 66, 68
Эпителиальная гиперплазия – заболевание, сопровождающееся появлением наростов на коже13, 32
Папилломатоз дыхательных путей – разрастание полипов в носоглотке и трахее6,11,30
Злокачественные опухоли лёгких и шеи2,6, 11, 16,18, 30

Как сделать интерпретацию результата анализов на ПЦР максимально точной

Для этого нужно сдать анализ с поверхности шейки матки на PAP-тест и пройти одно из ДНК исследований:

  • ДНК-диагностика выявит вирус, его концентрацию и тип. Однако с её помощью невозможно узнать, начал ли вирус атаковать ткани шейки матки и насколько сильно такое поражение. Вирусная нагрузка даёт только косвенные сведения, поскольку развитие рака и других болезней зависит от иммунитета, состояния организма, сопутствующих заболеваний, типа вируса и других факторов. Поэтому даже низкая вирусная нагрузка не даст гарантию, что у пациентки не разовьется злокачественное новообразование шейки матки.
  • PAP-тест выявит клетки, образующиеся при папилломавирусной инфекции. Это укажет на наличие вируса и факт его проникновения в ткани. Метод также покажет тяжесть поражения.
Читайте также:  Изопринозин от впч дозировка

ДНК-диагностика

PAP-тест

Однако даже имея на руках результаты двух анализов, провести их интерпретацию самостоятельно практически невозможно. Для этого нужно провести осмотр пациентки и сопоставить картину состояния шейки с результатами диагностики. Это под силу только опытному врачу-гинекологу с хорошим багажом знаний и специальной аппаратурой. Поэтому, пытаясь самостоятельно расшифровать данные, можно пропустить опасное заболевание.

Для сдачи анализов на ВПЧ и их расшифровки нужно обратиться в Университетскую клинику.Здесь можно проверить состояние шейки матки с помощью видеокольпоскопа – прибора, позволяющего осмотреть ее поверхность вывести изображение на экран. Врачи клиники не только выявят наличие ВПЧ, но и проведут лечение вызванных им поражений-дисплазии, кондилом, папиллом.

Лечение проводится с помощью лазерных, радиоволновых, световых и других щадящих методов, минимальная травмирующих место удаления. После такой процедуры очень быстро восстанавливаются ткани, а на месте патологического очага не остаётся рубцов, стянутости и других остаточных явлений.

  • Интерпретация результата анализов ВПЧ: расшифровка цитологии и гистологии
  • Расшифровка анализа на ВПЧ: подробная интерпретация цитологического и гистологического анализов
  • ДНК – анализы на ВПЧ

Поделиться ссылкой:

Источник



Бородавка, или папиллома, — это не только косметический недостаток. Эти новообразования могут быть смертельно опасны. Вызывает их особый вирус — вирус папилломы человека (ВПЧ). И передается он, увы, очень легко. Чтобы узнать наверняка, заражены ли вы, и принять меры, необходимо сдать анализы на ВПЧ.

Что такое ВПЧ и когда назначают анализы на его выявление

ВПЧ — это папилломавирус, который передается только от человека к человеку. Он укореняется в глубоких слоях кожи, а его размножение проходит в верхних слоях эпителия. Захватывая клетку, вирус «ломает» нормальный механизм ее деления. Так и возникают новообразования.

ВПЧ считается одним из самых распространенных вирусов, которые передаются половым путем. Заразиться им легко — врачи отмечают, что за последние десятилетия количество зараженных возросло практически в десять раз.



Цифры и факты




Некоторые врачи полагают, что 80% населения планеты инфицировано тем или иным типом вируса папилломы человека.

Известно более сотни разновидностей вируса. Из них примерно 40 вызывают новообразования (кондиломы) на слизистой оболочке половых органов. Некоторые виды не несут почти никакого вреда организму, однако определенные подтипы являются онкогенными и могут спровоцировать развитие рака.

Проявления деятельности этих вирусов различны. ВПЧ типа 1–4 вызывают бородавки на подошвенной части ступней, эти новообразования напоминают мозоли. ВПЧ типа 10, 28 и 49 виновны в появлении плоских бородавок. ВПЧ 27 вызывает рост обычных бородавок. ВПЧ 6, 11, 13, 16, 18, 31, 33, 35 провоцируют появление на половых органах остроконечных кондилом и папиллом. Самые опасные типы ВПЧ — 30, 39, 40, 42, 43, 52, 55, 57–59, 61, 62, 67–70. Они вызывают новообразования, которые классифицируются как предраковые.

Нужно ли вам сдавать анализ на ВПЧ? Скорее всего, да. Особенно если вы входите в группу риска. Вирус папилломы человека передается разными путями:

  • при незащищенном половом акте. Он может передаться и при поцелуе, если во рту или на губах есть ранки;
  • при родах — от матери к ребенку;
  • бытовым путем. Заразиться вирусом папилломы возможно при несоблюдении правил гигиены в сауне, бассейне, в туалете, при использовании чужой зубной щетки, бритвенного станка, посуды, полотенца, особенно если есть повреждения слизистых оболочек и кожных покровов. Вне тела этот вирус живет недолго, однако достаточно, чтобы заразить человека.

Генетической предрасположенности к этому вирусу нет. Риск заразиться возрастает при несоблюдении правил гигиены, игнорировании средств защиты при сексе, а также при пониженном иммунитете. Вредные привычки также ослабляют организм и делают его более уязвимым.

Какие анализы на выявление ВПЧ существуют и как они проводятся

Обычно направление на анализ на ВПЧ выдает гинеколог, уролог или дерматолог. Сегодня существует много точных способов выяснить не только сам факт наличия вируса папилломы человека в крови, но и определить, к какому типу он принадлежит — безвредному или опасному.


  • Кольпоскопия


    Это визуальное исследование шейки матки при помощи специального прибора — кольпоскопа. Он позволяет детально рассмотреть слизистые оболочки, увеличив картинку в несколько раз и заметить папилломы, если они есть.

  • Цитологический метод


    Исследование мазка при помощи микроскопа. Результаты 1–2 классов означают, что все в порядке, при результатах 3 класса назначают дополнительное обследование (как правило, гистологическое), а результаты 4–5 классов указывают на наличие злокачественных клеток. Критерием наличия папилломавирусной инфекции при цитологическом исследовании является наличие в мазках особых видоизмененных клеток — койлоцитов и дискератоцитов.

  • Гистологическое исследование биоптатов


    Для такого исследования врач берет очень маленький образец ткани и исследует его при помощи микроскопа на наличие видоизмененных клеток, пораженных вирусом.

  • Обнаружение антител к вирусу папилломы человека


    Метод ранней диагностики, так как антитела появляются намного раньше, чем собственно проявления деятельности вируса. Однако этот тест не показывает концентрацию и не позволяет со 100-процентной точностью определить тип вируса. Материалом для исследования служит кровь.

  • Digene-тест (амплификационный)


    Новый и очень точный метод анализа на ВПЧ, который показывает концентрацию вируса, его тип и онкогенность. В качестве материала используется соскоб со слизистой влагалища или уретры. Digene-тест часто назначают вместе с цитологическим исследованием для получения определенных результатов.

  • ПЦР (неамплификационный)


    Это широко распространенный анализ на ВПЧ онкогенных типов. Материал для анализа — мазок со слизистой, иногда — кровь, моча, околоплодные воды. Метод основывается на обнаружении ДНК вируса и позволяет с большой точностью определить, заражен пациент или нет. Проводить это исследование должен опытный и ответственный специалист, так как при несоблюдении технологии результат может быть ложноотрицательным или ложноположительным.

Для пациента практически все анализы на ВПЧ просты, безболезненны и нетравматичны. Если для анализа берется материал из влагалища или уретры, необходима минимальная подготовка. За 3 дня до сдачи биоматериала нужно отказаться от использования любых антибактериальных и противовирусных средств, а также от антибактериальных средств для интимной гигиены. В день сдачи анализа не рекомендуется проводить гигиенических процедур, желательно также не мочиться за 2 часа до забора материала (особенно это касается мужчин). У женщин анализ не берут во время менструации и в течение 2–3 дней после ее окончания. Использование противозачаточных влагалищных мазей, гелей и губок также может исказить результат, поэтому все эти средства нужно отменить за 3 дня до сдачи анализа.

Анализ крови рекомендуется сдавать натощак — это значит, в течение 10–12 часов перед визитом к доктору лучше ничего не есть и пить только воду. Хорошо бы также за 2–3 дня исключить алкоголь и вредную пищу. И мужчины, и женщины должны воздерживаться от половых контактов в течение двух дней перед забором материала.

Расшифровка результатов анализа на ВПЧ

Расшифровать результаты анализов на ВПЧ может только врач. Некоторое представление о форме результатов и правилах интерпретации стоит знать пациенту. Однако помните, что все найденное в Интернете, предназначено только для ознакомления, но никак не для самостоятельной постановки диагноза.

Больше всего вопросов вызывают результаты Digene-теста. Если на бланке написано «ДНК не обнаружено», это говорит об отсутствии вируса. Менее 3 Lg говорит о незначительной концентрации вируса, 3–5 Lg — о клинически значимой, более 5 Lg — об очень высокой.

Вирус папилломы человека особенно опасен для женщин, он может вызывать рак шейки матки и другие онкологические заболевания. И с возрастом этот риск становится только выше. До 30 лет более 70% заболеваний, вызванных вирусом папилломы, спонтанно подлежат обратному развитию. Однако в более старшем возрасте поражения регрессируют гораздо реже. Впрочем, вирус папилломы человека опасен и для мужчин. Разрастаясь в мочеиспускательном канале, папилломы могут полностью перекрыть его просвет и вызвать серьезные проблемы, вплоть до импотенции, бесплодия и онкологических заболеваний.


Анализы на выявление ВПЧ и его подтипа просты в исполнении, не требуют от пациента сложной подготовки и длительного ожидания результатов. Между тем важность ранней диагностики ВПЧ-поражений сложно переоценить. Правильно выбранная терапия позволит значительно снизить риск развития рака.

Источник

[09-106]
Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

900 руб.

Выявление возбудителя папиллома-вирусной инфекции (Human Papillomavirus), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) исследуется ДНК вирусов в образце биоматериала. При этом определяется наличие высококанцерогенных типов вируса (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и/или 59), производится их типирование.

Синонимы русские

Папиллома-вирусы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), вирусы папилломы высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы).

Читайте также:  Вакцина впч у мужчин

Синонимы английские

Papillomavirus hominis, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 types, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Общая информация об исследовании

Вирусы папилломы человека (ВПЧ) широко распространены, поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передается при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду. Человек может быть инфицирован несколькими типами ВПЧ.

К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путем, курение и проживание в крупных городах.

Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30  % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.

При острой инфекции возникают доброкачественные образования, такие как папилломы, бородавки, кондиломы. У детей папиллома-вирусы могут приводить к папилломатозу гортани. Поражение клеток трофобласта папиллома-вирусами чревато спонтанным абортом.

Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулезу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.

Для выявления ВПЧ высокого онкогенного риска используется в основном полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, которая позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале и идентифицировать его отдельные типы. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления папиллома-вирусной инфекции высокого онкогенного риска.
  • Для подтверждения/исключения персистирования определенного типа ВПЧ.
  • Чтобы оценить степень канцерогенного риска у женщин с дисплазией эпителия шейки матки.

Когда назначается исследование?

  • При первичном скрининге рака шейки матки (наряду с цитологическим исследованием) у женщин старше 30 лет.
  • После хирургического лечения цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN II) для выявления/исключения персистенции определенного типа ВПЧ высокого онкогенного риска (оценка в динамике).
  • При сомнительных результатах цитологического исследования гинекологических мазков.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

  • Инфицирование папиллома-вирусом.

Причины отрицательного результата

  • Отсутствие папиллома-вирусной инфекции.
  • Низкое содержание ВПЧ в крови.

Выявление ДНК ВПЧ в исследуемом материале свидетельствует о наличии папиллома-вирусной инфекции. Если ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие папиллома-вирусной инфекции маловероятно.



Важные замечания

  • Положительный результат исследования на ДНК ВПЧ чаще всего не позволяет прогнозировать развитие рака шейки матки, поскольку примерно в 80 % случаев инфицирование заканчивается спонтанным выздоровлением. Однако выявление ВПЧ-инфекции при дисплазии эпителия шейки матки обладает большой прогностической значимостью и позволяет судить о степени канцерогенного риска.
  • Разработаны вакцины против ВПЧ типов 16 и 18 (причина 70  % случаев рака шейки матки) и 6 и 11 (причина 90 % случаев генитальных бородавок). Вакцины предназначены для предупреждения инфицирования ВПЧ.

Также рекомендуется

  • Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
  • Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
  • Human Papillomavirus, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
  • Human Papillomavirus 6/11 (HPV 6/11), ДНК [реал-тайм ПЦР]
  • Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК количественно, без определения типа [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог, педиатр, ЛОР.

Литература

  • Папиллома-вирусная инфекция урогенитального тракта женщин (эпидемиология, клинико-патогенетические особенности, методы диагностики, лечение, профилактика): информационно-методическое пособие / Е. В. Фоляк, Т. М. Соколова, К. Ю. Макаров, А. В. Якимова, В. Р. Мухамедшина, А.В . Усова. – Новосибирск : Вектор-Бест, 2010. – 88 с.
  • Кулаков В. И., Прилепская В. Н. Профилактикарака шейки матки : руководство для врачей. – М. : МЕДпресс-информ, 2008. – 56 с.
  • Bonnez W., Reichman R.C. Papillomaviruses. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
  • Garcea R. L. The papillomaviruses / R.L. Garcea, D. DiMaio. – Springer, 2007. – 419 p.

Источник