Пцр впч вкр титр
Диагностирование ВПЧ осложняется вялым развитием процессов в молодом организме, которые часто не дают специфической симптоматики. Для выявления болезни на ранней стадии и профилактического контроля заболеваемости используют централизованный скрининг на ВПЧ ВКР.
Что такое скрининг ВПЧ ВКР
Скрининг – это целенаправленное обследование определенных групп населения с целью выявить заболевание. Скрининг проводится по специально разработанной методике подготовленным персоналом.
ВПЧ представляет собой заразные штаммы ДНК содержащего папилломавируса.
Все папилломавирусы (а их насчитывается больше сотни) делят на:
- высокоонкогенные штаммы – вирусы, которые способны вызвать дисплазию тканей кожи или слизистых человека, с последующим их злокачественным перерождением;
- низкоонкогенные – группа вирусов, деятельность которых вызывает доброкачественные образования (папилломы, бородавки).
Обратите внимание! Аббревиатура ВКР означает высокий канцерогенный риск. ВПЧ ВКР – так обозначают штаммы вируса, которые вызывают рак. У женщин это рак шейки матки, у мужчин – рак полового члена. Для Европейских жителей и населения России это 18, 16, 31 и 45 генотипы папилломавируса.
При активизации ВПЧ типа ВКР происходит изменение и перерождение тканей, которое оканчивается злокачественным процессом.
Скрининг на папилломавирусы высокой степени онкогенности проводят пошагово, по специально разработанной схеме:
- Проведение анализа цервикального мазка на предмет наличия или отсутствия измененных клеток (дисплазии) в организме пациента (ПАП тест).
- При положительной реакции на ПАП-тест проводят количественное определение вируса, его идентификацию (расширенный скрининг).
Фото 1: Скрининг на ВПЧ ВКР показан всем женщинам, начиная с 24 летнего возраста. Проводится должен при прохождении плановой диспансеризации населения, при профессиональных медосмотрах, по личному обращению пациентки. Источник: flickr (Eugene Evehealth).
Рекомендуемая периодичность мероприятия 1 раз в 3 года.
Обратите внимание! Скрининг позволяет снизить заболеваемость раком половых органов в сотни раз, что имеет важное значение при растущей тенденции заражения.
Показания для сдачи анализов
Показанием для сдачи анализов является:
- появление кондилом (иных новообразований) на половых органах, в анальной зоне или ротовой полости;
- выделения из половых органов неясной этиологии;
- личное беспокойство человека по поводу возможного заражения после незащищенного контакта;
- профилактический контроль.
Важность обследования
Важно! Выявление дисплазии тканей слизистых половых органов на ранней стадии имеет решающее значение при прогнозе эффективности терапии. Раннее выявление ВПЧ ВКР в организме позволяет принять превентивные терапевтические меры для его уничтожения.
От инфицирования до развития рака проходит от 5 до 15 лет. Выявление латентной формы присутствия вируса в организме дает:
- возможность динамического контроля состояния половых органов и деятельности вируса (вирусоносителям повторяют обследование ежегодно);
- возможность раннего лечения, когда прогноз наиболее благоприятен.
Статистика показывает, что рак шейки матки занимает 3 место среди онкологии половых органов женщины. Исследования причин развития онкопатологии матки подтверждают прямую связь между инфицированием ВПЧ ВКР и последующим развитием рака.
Фото 2: Каждая 8 из 10 женщин, перешагнувших 50-летний рубеж, заражена или переболела ВПЧ. Эта цифра увеличивается год от года в связи с все большей сексуальной активностью населения. Источник: flickr (Eugene Evehealth).
Виды скрининга на ВПЧ ВКР
Наиболее информативной и недорогой является методика скрининга, которая используется в России – исследование на цитологию позволяет на первом этапе «отсеять» здоровых обследуемых, дальнейшее исследование проводить только пациентам с выявленной дисплазией тканей.
Анализ на цитологию (ПАП-тест)
ПАП-тест это анализ по методике Папаниколау.
Этот вид тестирования отличает высокая точность анализа.
Для проведения анализа делается забор материала из цервикального канала шейки матки у женщин или уретры у мужчин. Процедура безболезненная, проводится в условиях обычного осмотра.
Материал помещается либо на стекло (уходящая практика), либо в специальную жидкостную среду, что удобнее для проведения исследования.
Жидкостный ПАП-тест берется специальной щеточкой, которая помещается в подготовленную жидкую среду для транспортировки и хранения. Такая методика забора и хранения биоматериала позволяет сохранить и проанализировать все клетки взятого эпителия.
Как подготовиться к процедуре
Для того, чтобы ПАП-тест был максимально достоверным следует соблюдать несколько условий:
- за 2 дня до посещения врача отказаться от половых контактов, спринцеваний, введения вагинальных медицинских средств;
- женщинам визит следует планировать в первой половине менструального цикла, но после полного окончания месячного кровотечения;
- исследование не проводят в период обострения хронических инфекций или остропротекающих заболеваний;
- исследование не проводят непосредственно после курса антибактериальной или противовоспалительной медикаментозной терапии.
Расширенный скрининг
Обратите внимание! Расширенный скрининг представляет собой контролируемый забор биоматериала для проведения анализа в режиме реального времени на определение не только наличия или отсутствия ВПЧ, но и типа, количества папиллома вируса человека онкогенной группы.
Анализ проводится методом ПЦР качественного направления на основе RT-PCR.
Данная методика позволяет интерпретировать результаты анализов для расшифровки по Дайджин-тесту. И корректировать дальнейшую тактику работы с пациентом.
Забор биоматериала не отличается от обычного взятия мазка. Требования по подготовке к расширенному тестированию такие же как и к ПАП-тесту:
- Воздержание от применения лекарственных средств влагалищных за 2 суток до;
- Воздержание на этот же период от половых контактов;
- Отсутствие менструального кровотечения.
ПЦР анализ
Анализ выявления ВПЧ с использованием полимерно-цепной реакции (ПЦР-тест) на его ДНК обладает высокой степенью достоверности. С его помощью можно определить:
- факт инфицирования;
- генотип папилломавируса;
- степень распространения (количественный анализ).
Анализ возможен на любой жидкости из организма пациента: кровь, слизистое отделяемое, моча.
Подготовка
- Женщинам не следует сдавать биоматериал из влагалища во время менструации;
- Мужчинам запрещено мочиться за 1,5 часа до процедуры;
- Кровь сдают на голодный желудок;
- При заборе материала из половых органов женщинам запрещено спринцеваться накануне вечером;
- Исключаются любые медикаменты за 2 дня до проведения забора биоматериала.
Результаты анализов
- Тест по Папаниколау (ПАП-тест) может быть отрицательным (измененные клетки не обнаружены) или положительным (во взятом образце обнаружены онкоклетки);
- ПЦР-тест показывает наличие или отсутствие ВПЧ;
- Расширенный скрининг определяет тип вируса и его количество.
Количественный результат по Дайджин-тесту интерпретируется:
- менее 3 Lg – концентрация вируса незначительная;
- от 3 Lg до 5 Lg – средняя степень присутствия;
- более 5 Lg – высокая концентрация ВПЧ.
Источник
Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения.
Готовый анализ на ВПЧ выглядит в виде бланка, на котором указываются:
- Дата исследования. Она очень важна, поскольку концентрация ВПЧ часто оценивается в динамике. В этом случае самым важным фактором является рост концентрации вируса. Быстрое увеличение уровня ВПЧ гораздо опаснее слегка его повышенной концентрации, сохраняющейся в течение длительного времени. Поэтому результаты анализа надо сохранить.
- Номер пробирки, присваиваемый каждому образцу, поступающему в лабораторию.
- ФИО пациента и его пол.
- Данные врача и лаборатории, проводившей исследование.
Результат анализа выдается в виде таблицы, где указывается абсолютная и относительная концентрация каждого из вирусов и общая вирусная нагрузка. В нём обязательно указывается концентрация вирусов штаммов 16, 18 и 31, чаще всего вызывающих рак шейки матки, и остальных, которые предусмотрены данным методом исследования.
Пример бланка с результатами анализов на папилломавирус
Бланк анализа на ВПЧ
Абсолютная вирусная нагрузка – это количество вируса обнаруженного в образце. Если ВПЧ отсутствует или его концентрация не превышает клинически значимую, в бланке ставится пометка «вирус отсутствует» или «не обнаружен». Такая запись не означает, что возбудителя вообще нет в организме. Это маловероятно, поскольку папилломавирус встречается у 80% населения. Просто его концентрация недостаточна для развития рака шейки матки и других заболеваний.
Если абсолютное содержание ВПЧ превышает клинически значимое, напротив штамма вируса указывается его концентрация (вирусная нагрузка). Чем она выше, чем хуже результат.
Абсолютная вирусная нагрузка ВПЧ при поражениях шейки матки разной тяжести, копий/мл (геном-эквивалентов на 105 клеток эпителия человека). Таблица результатов
| Вирусная нагрузка | Поражение шейки матки | Показатель Lg (абсолютных копий) ВПЧ/10 5 клеток |
| Клинически малозначимая | от 103 до 105 | < 3 |
| Умеренная | 105–107 | 3 – 5 |
| Высокая | Более 107 | Более 5 |
Чем выше концентрация вирусов в мазке, тем существеннее риск возникновения болезней вызываемых папилломавирусом – злокачественных опухолей, бородавок, кондилом, папиллом, папилломатоза дыхательных путей.
В бланке указывается показатель КВМ – контроль взятия материала, характеризующий его качество. Нормальный показатель КВМ должен быть не менее 4. Его уменьшение говорит о нехватке нормального объема ДНК, необходимого для проведения исследования. При низком КВМ проводится повторное взятие материала.
Относительная нагрузка – отношение вирусной нагрузки к КВМ. Результат расшифровки показателя таблицы
| Относительная нагрузка | Расшифровка |
| «Не выявлено». | Вирус в организме не обнаружен или его концентрация невелика |
| Отрицательный показатель | Количество вирусов гораздо меньше числа здоровых клеток. Возбудитель находится в «спящем» состоянии или его концентрация снижается |
| Положительный показатель | Распространение инфекции или ее рецидив (возврат) после лечения. Это плохой результат анализа ВПЧ |
Общая вирусная нагрузка важна в случае, если имеется поражение несколькими возбудителями. Для подсчета суммируют все имеющиеся вирусные показатели.
По расшифровке результатов анализа, в котором выявлены те или иные типы ВПЧ, можно выявить, какое именно заболевание грозит пациенту.
Таблица расшифровки анализа на ВПЧ с вероятным диагнозом
| Заболевания | Штамм ВПЧ |
| Различные типы бородавок – обычные (вульгарные), юношеские (плоские), подошвенные (шипицы) | 1-4, 10, 26, 27 – 29, 49, 57 |
| Бородавки мясников (крупные бородавчатые наросты на теле) | 7 |
| Верруциформная эпидермодисплазия – заболевание, сопровождающееся появлением грубых толстых наростов на лице, теле и конечностях, напоминающих кору дерева | 2, 3, 5, 8-10-12, 14, 15, 18- 20, 36, 37, 46, 47, 50 |
| Кондиломы (генитальные бородавки) | 6, 11, 16, 18, 33, 39, 40, 42-43, 51-52 54-55, 57, 61-62, 64-67 |
| Дисплазия и рак шейки матки. Злокачественные опухоли анального канала прямой кишки | 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39-40, 42-43, 45, 50 – 52, 54-56 ,61- 62, 64, 66, 68 |
| Эпителиальная гиперплазия – заболевание, сопровождающееся появлением наростов на коже | 13, 32 |
| Папилломатоз дыхательных путей – разрастание полипов в носоглотке и трахее | 6,11,30 |
| Злокачественные опухоли лёгких и шеи | 2,6, 11, 16,18, 30 |
Как сделать интерпретацию результата анализов на ПЦР максимально точной
Для этого нужно сдать анализ с поверхности шейки матки на PAP-тест и пройти одно из ДНК исследований:
- ДНК-диагностика выявит вирус, его концентрацию и тип. Однако с её помощью невозможно узнать, начал ли вирус атаковать ткани шейки матки и насколько сильно такое поражение. Вирусная нагрузка даёт только косвенные сведения, поскольку развитие рака и других болезней зависит от иммунитета, состояния организма, сопутствующих заболеваний, типа вируса и других факторов. Поэтому даже низкая вирусная нагрузка не даст гарантию, что у пациентки не разовьется злокачественное новообразование шейки матки.
- PAP-тест выявит клетки, образующиеся при папилломавирусной инфекции. Это укажет на наличие вируса и факт его проникновения в ткани. Метод также покажет тяжесть поражения.
ДНК-диагностика
PAP-тест
Однако даже имея на руках результаты двух анализов, провести их интерпретацию самостоятельно практически невозможно. Для этого нужно провести осмотр пациентки и сопоставить картину состояния шейки с результатами диагностики. Это под силу только опытному врачу-гинекологу с хорошим багажом знаний и специальной аппаратурой. Поэтому, пытаясь самостоятельно расшифровать данные, можно пропустить опасное заболевание.
Для сдачи анализов на ВПЧ и их расшифровки нужно обратиться в Университетскую клинику.Здесь можно проверить состояние шейки матки с помощью видеокольпоскопа – прибора, позволяющего осмотреть ее поверхность вывести изображение на экран. Врачи клиники не только выявят наличие ВПЧ, но и проведут лечение вызванных им поражений-дисплазии, кондилом, папиллом.
Лечение проводится с помощью лазерных, радиоволновых, световых и других щадящих методов, минимальная травмирующих место удаления. После такой процедуры очень быстро восстанавливаются ткани, а на месте патологического очага не остаётся рубцов, стянутости и других остаточных явлений.
- Интерпретация результата анализов ВПЧ: расшифровка цитологии и гистологии
- Расшифровка анализа на ВПЧ: подробная интерпретация цитологического и гистологического анализов
- ДНК – анализы на ВПЧ
Поделиться ссылкой:
Источник
[09-106]
Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]
900 руб.
Выявление возбудителя папиллома-вирусной инфекции (Human Papillomavirus), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) исследуется ДНК вирусов в образце биоматериала. При этом определяется наличие высококанцерогенных типов вируса (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и/или 59), производится их типирование.
Синонимы русские
Папиллома-вирусы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), вирусы папилломы высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ВПЧ высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы).
Синонимы английские
Papillomavirus hominis, 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 types, DNA.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.
Общая информация об исследовании
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) широко распространены, поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и обладают онкогенным потенциалом. ВПЧ передается при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду. Человек может быть инфицирован несколькими типами ВПЧ.
К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путем, курение и проживание в крупных городах.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.
При острой инфекции возникают доброкачественные образования, такие как папилломы, бородавки, кондиломы. У детей папиллома-вирусы могут приводить к папилломатозу гортани. Поражение клеток трофобласта папиллома-вирусами чревато спонтанным абортом.
Объединение ДНК папиллома-вируса с геном клетки приводит к дисплазии/неоплазии (чаще всего в переходной зоне шейки матки). К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68. Инфицирование ими приводит к относительно доброкачественному бовеноидному папулезу или плоскоклеточным интраэпителиальным неоплазиям шейки матки.
Для выявления ВПЧ высокого онкогенного риска используется в основном полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, которая позволяет найти ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале и идентифицировать его отдельные типы. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Для чего используется исследование?
- Для выявления папиллома-вирусной инфекции высокого онкогенного риска.
- Для подтверждения/исключения персистирования определенного типа ВПЧ.
- Чтобы оценить степень канцерогенного риска у женщин с дисплазией эпителия шейки матки.
Когда назначается исследование?
- При первичном скрининге рака шейки матки (наряду с цитологическим исследованием) у женщин старше 30 лет.
- После хирургического лечения цервикальной интраэпителиальной неоплазии (CIN II) для выявления/исключения персистенции определенного типа ВПЧ высокого онкогенного риска (оценка в динамике).
- При сомнительных результатах цитологического исследования гинекологических мазков.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата
- Инфицирование папиллома-вирусом.
Причины отрицательного результата
- Отсутствие папиллома-вирусной инфекции.
- Низкое содержание ВПЧ в крови.
Выявление ДНК ВПЧ в исследуемом материале свидетельствует о наличии папиллома-вирусной инфекции. Если ДНК ВПЧ в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие папиллома-вирусной инфекции маловероятно.
Важные замечания
- Положительный результат исследования на ДНК ВПЧ чаще всего не позволяет прогнозировать развитие рака шейки матки, поскольку примерно в 80 % случаев инфицирование заканчивается спонтанным выздоровлением. Однако выявление ВПЧ-инфекции при дисплазии эпителия шейки матки обладает большой прогностической значимостью и позволяет судить о степени канцерогенного риска.
- Разработаны вакцины против ВПЧ типов 16 и 18 (причина 70 % случаев рака шейки матки) и 6 и 11 (причина 90 % случаев генитальных бородавок). Вакцины предназначены для предупреждения инфицирования ВПЧ.
Также рекомендуется
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
- Human Papillomavirus, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus 6/11 (HPV 6/11), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК количественно, без определения типа [реал-тайм ПЦР]
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог, педиатр, ЛОР.
Литература
- Папиллома-вирусная инфекция урогенитального тракта женщин (эпидемиология, клинико-патогенетические особенности, методы диагностики, лечение, профилактика): информационно-методическое пособие / Е. В. Фоляк, Т. М. Соколова, К. Ю. Макаров, А. В. Якимова, В. Р. Мухамедшина, А.В . Усова. – Новосибирск : Вектор-Бест, 2010. – 88 с.
- Кулаков В. И., Прилепская В. Н. Профилактикарака шейки матки : руководство для врачей. – М. : МЕДпресс-информ, 2008. – 56 с.
- Bonnez W., Reichman R.C. Papillomaviruses. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
- Garcea R. L. The papillomaviruses / R.L. Garcea, D. DiMaio. – Springer, 2007. – 419 p.
Источник