Пцр впч вкр тип 68
Медицинский эксперт статьи
х
Весь контент iLive проверяется медицинскими экспертами, чтобы обеспечить максимально возможную точность и соответствие фактам.
У нас есть строгие правила по выбору источников информации и мы ссылаемся только на авторитетные сайты, академические исследовательские институты и, по возможности, доказанные медицинские исследования. Обратите внимание, что цифры в скобках ([1], [2] и т. д.) являются интерактивными ссылками на такие исследования.
Если вы считаете, что какой-либо из наших материалов является неточным, устаревшим или иным образом сомнительным, выберите его и нажмите Ctrl + Enter.
В числе известных на сегодняшний день штаммов ДНК-геномного вируса папилломы человека (ВПЧ) наиболее изучен род альфа-папилломавирусов (Alphapapillomavirus). К этому роду относятся вирусы высокого онкогенного риска. Некоторые эксперты причисляют к ним и ВПЧ 68, хотя и считают его малораспространенным типом.
Структура ВПЧ 68 типа
Структура ВПЧ 68 практически ничем не отличается от других папилломавирусов. ВПЧ 68 типа образует икосаэдрический капсид (протеиновую оболочку) диаметром 50 нм. Капсид состоит из связанных друг с другом дисульфидными связями 72 пентамеров структурного белка L1. Это связывание опосредует конформационные изменения в капсиде вируса, что обеспечивает первоначальное прикрепление вириона к клетке хозяина и способствует заражению. [1]
Двухцепочечная кольцевая ДНК ВПЧ 68 имеет область, которая кодирует ранние белки E1-E7, и область L, кодирующую поздние структурные белки оболочки вируса (L1 и L2).
Жизненный цикл вируса состоит из нескольких этапов. На начальном этапе вирус должен прикрепиться к клетке и проникнуть через ее мембрану внутрь – путем эндоцитоза. Затем вирусная ДНК высвобождается в ядро клетки хозяина, интегрируясь в ее геном. После этого внутри ядра пораженной клетки происходит сборка вириона – с инкапсуляцией геномной ДНК белком L2.
В репликации вирусного генома ведущую роль играют белки вируса E6 и E7, которые считаются онкогенными. Они не только используют механизм репликации клеточной ДНК для внедрения собственной ДНК в клетки, но и нейтрализуют клеточный белок p53 – супрессор опухолей. Кроме того, белок Е7, взаимодействуя с трансмембранным белком TMEM173, индуцирующим выработку интерферона типа I, подавляет врожденный иммунитет. [2]
Таким образом ВПЧ защищается от защитных механизмов хозяина на вне- и внутриклеточном уровнях. А при высокой активности иммунной системы вирус может пережидать неблагоприятные для себя условия, находясь в латентной форме.
Читайте также – Вирус папилломы человека: структура, жизненный цикл, как передается, профилактика
К вопросу об онкогенности ВПЧ 68 типа
Многие типы вируса папилломы человека рода Alphapapillomavirus отличаются высоким риском развития онкологии. Число таких типов варьируется от 13 до 19, и только у 11 из них онкогенность доказана Это ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 45, 39, 51, 52, 56, 58.
Они заражают преимущественно слизистую оболочку аногенитальной области, полости рта и ротоглотки. Самые распространенные из них: HPV 16, 18, 45, 31, 33, 35, 52 и 58.
Степень канцерогенности данных типов различна. Она очень высокая у ВПЧ 16 и чуть меньшая у ВПЧ 18, которые вызывают около 72% случаев развития онкозаболеваний, связанных с папилломатозной инфекцией.
Почти в 18% случаев рака шейки матки выявляются вирусы группы A9 (ВПЧ 31, 33, 35, 52, 58) и A7 (ВПЧ 45 и 59). А на долю ВПЧ 68, ВПЧ 66, ВПЧ 26, ВПЧ 53, ВПЧ 70, ВПЧ 73 и ВПЧ 82 – как этиологического фактора онкогенеза и единичных ВПЧ-инфекций при инвазивном раке шейки матки – в совокупности приходится 0,9-1,7%. По данным некоторых исследований, в 55,3% случаев генотипы вирусов групп A7 или A9 выявляются в качестве коинфекций.
Не имея достаточных клинических и эпидемиологических данных, которые доказывали бы онкогенность ВПЧ 68, Международным агентством по исследованию рака (IARC) ВОЗ данный тип папилломавируса пока классифицируется как вероятно канцерогенный.
По последним данным американского Национального института рака (NCI), ВПЧ является основной причиной примерно 5% всех случаев рака в мире.
Симптомы
Неоплазии шейки матки считается результатом персистирующей инфекции папилломы человека. При этом самостоятельно ВПЧ 68 реже других бывает причастен к злокачественной опухоли cervix uteri.
Эксперты считают, что ВПЧ 68 у женщин может вызывать дисплазию шейки матки, которую сопровождают такие симптомы, как неприятные ощущения, а также зуд, жжение или боль в области гениталий и надлобковой области; нехарактерные выделения из влагалища.
Подробнее в публикациях:
- Симптомы дисплазии шейки матки
- Предраковые заболевания шейки матки
Проблемы, связанные с вирусом папилломы человека, касаются и мужчин, так как основной способ передачи вируса – половой. И ВПЧ 68 типа у мужчин может стать причиной развития рака полового члена, анального рака, опухоли ротоглотки и гортани.
Какие могут быть симптомы, детально в публикациях:
- Рак полового члена – Симптомы и диагностика
- Аноректальный рак
- Симптомы рака горла
Диагностика
Как проводится диагностика вируса папилломы человека, детально в статьях:
- Папилломавирусная инфекция: обнаружение вируса папилломы человека
- Анализы на вирус папилломы человека
- Диагностика дисплазии шейки матки
Что касается методов количественного определения общего ВПЧ высокого риска, то здесь используется ПЦР в реальном времени (тест Hybrid Capture II). Этот анализ помогает в диагностике ВПЧ-инфекции, передаваемой половым путем, и обеспечивает качественное молекулярное обнаружение 13 различных типов ВПЧ высокого риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 – без дифференциации индивидуального типа вируса (то есть генотипирования). Поэтому такого понятия, как норма ВПЧ 68 типа, не существует, а результат анализа устанавливает вирусную нагрузку – количество копий геномной ДНК (Lg) на эквивалент клеток (log10 вирусных копий/1 нг клеточной ДНК). Если в расшифровке анализа показатель не превышает 3 Lg, то концентрация ВПС считается клинически незначительной. [3]
У нас пока недоступен набор для ПЦР с генотипом-титром HPV HCR (R-V67-F-CE) для выявления, дифференциации и количественной оценки 14 типов ВПЧ (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68). Здесь каждый тип ВПЧ регистрируется отдельно, что дает возможность дифференцировать генотип вируса и определять его количество. [4]
Профилактика ВПЧ 68 типа
В качестве профилактики заражения вирусом папилломы человека медики рекомендуют:
- упорядоченный секс и защищенные половые контакты;
- женщинам – проходить профилактические осмотры у гинеколога, мужчинам – обращаться к врачу при любых тревожных симптомах в аногенитальной области;
- укреплять иммунитет.
Прогноз
Даже ВПЧ высокого онкогенного риска рак развивается не у всех, но при ослабленном иммунитете прогноз, безусловно, ухудшается, поскольку в таком случае ничто не мешает репликации вирусной ДНК и последующей злокачественной трансформации инфицированных клеток.
Источник
[09-184]
Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 типы), ДНК количественно, скрининг с определением возможности интеграции вируса в геном [реал-тайм ПЦР]
850 руб.
Исследование используется для диагностики папиллома-вирусной инфекции, с одновременным определением количества вирусной ДНК в исследуемом материале. Анализ позволяет сделать вывод о степени поражения слизистой, оценить эффективность терапии в процессе лечения. Определяется суммарное количество ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го генотипов. Тест также позволяет оценить вероятность интеграции ВПЧ 16-го, 18-го и 45-го типа в геном человека (что является опасным и прогностически неблагоприятным фактором).
Синонимы русские
Папиллома-вирусы высокого канцерогенного риска, вирусы папилломы высокого канцерогенного риска, ВПЧ высокого канцерогенного риска.
Синонимы английские
Human Papillomavirus, DNA; HPV, Viral Load.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Соскоб урогенитальный.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Женщинам исследование рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
- Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка.
Общая информация об исследовании
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой широко распространённую и вариабельную группу вирусов, поражающих эпителий кожи и слизистых оболочек и обладающих онкогенным потенциалом. ВПЧ передаётся при тесном контакте с инфицированным эпителием, поэтому основные пути заражения – половой и контактно-бытовой. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду.
К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, авитаминозы, инфекции, передаваемые половым путём, курение и проживание в крупных городах.
Инкубационный период может длиться от 2 месяцев до 2-10 лет. Характерно скрытое течение заболевания, при котором отсутствуют клинические проявления, а при кольпоскопическом, цитологическом и гистологическом обследовании выявляется норма. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев может произойти избавление от вируса. Диагностика скрытой ВПЧ-инфекции осуществляется только методом ПЦР.
ВПЧ может по-разному воздействовать на эпителий: способствовать возникновению доброкачественных образований (папиллом, кондилом) или объединению ДНК папиллома-вируса с геном клетки, что приводит к дисплазии (неоплазии) и в дальнейшем к раку (чаще всего в переходной зоне шейки матки).
К папиллома-вирусам высокого онкогенного риска относятся ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68.
Для выявления возбудителя используется метод полимеразной цепной реакции, которая позволяет обнаружить ДНК вируса. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.
По данным исследований, количественное содержание вируса в материале коррелирует со степенью неоплазии: чем выше вирусная нагрузка, тем выраженнее цитологические изменения в эпителии. При обследовании необходимо учитывать генотип вируса, наличие и степень цитологических и гистологических изменений в тканях, увеличение или снижение вирусной нагрузки через несколько месяцев (6 месяцев и более) после предыдущего обследования.
В исследовании проводится определение суммарного количества ДНК 14 типов ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) с отдельным определением ДНК ВПЧ 16, 18 и 45 генотипов. ВПЧ ВКР являются главной этиологической причиной развития РШМ и предшествующей ему тяжелой дисплазии. ВПЧ обнаруживается в 95 % случаев РШМ, из них 16, 18, 45 генотипы в совокупности являются причиной 75 % плоскоклеточных раков и 94 % аденокарцином шейки матки.
Известно, что развитие РШМ часто ассоциировано с интеграцией ДНК вируса в геном клетки-хозяина. Наиболее часто интегрируют ВПЧ 16 и 18 генотипов, при этом происходит разрыв участка Е1/Е2 при сохранении онкогена Е6/Е7. В тест-системе, на которой выполняется данное исследование, по разным каналам прибора детектируются разные участки генома ВПЧ 16, 18 и 45 типов. Выявление области Е6 при отсутствии области Е1/Е2 позволяет косвенно судить о возможности интеграции вируса в геном человека. В случае обнаружения возможности интеграции вируса в геном в бланк ответа выводится соответствующая информация.
Для чего используется исследование?
- Чтобы оценить риск развития новообразований, ассоциированных с ВПЧ (рак шейки матки, рак прямой кишки, рак аногенитальной области и других локализаций).
- Для контроля за эффективностью лечения предраковых заболеваний, ассоциированных с ВПЧ.
- Для мониторинга папиллома-вирусной инфекции и прогнозирования ее течения.
Когда назначается исследование?
- При выявлении цитологических изменений в мазке на атипию, в мазке по Папаниколау, в гистологическом препарате.
- При кондиломах и других морфологических изменениях половых путей.
- При скрининге рака шейки матки у женщин старше 25-30 лет (в качестве дополнительного исследования).
- При наблюдении за инфицированными ВПЧ.
- При лечении рака и предраковых состояний, ассоциированных с ВПЧ.
Что означают результаты?
Уровень вирусной нагрузки интерпретируется с учетом результатов цитологического исследования мазков, гистологических изменений в биоптате и генотипа вируса, изменении его количества с течением времени.
- Количество ДНК ВПЧ не определяется при отсутствии вируса в исследуемом образце или его минимальном количестве (ниже детектируемого уровня) – риск развития патологического процесса, связанного с ВПЧ, минимальный.
- Клинически малозначимая концентрация вируса (менее 103 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток) – минимальный риск развития дисплазии, транзиторное течение вирусного процесса.
- Клинически значимая концентрация вируса (более 103 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток) – хроническая инфекция с высоким риском развития дисплазии и РШМ.
- Более 105 копий ДНК ВПЧ на 105 клеток при установленном факте персистентного течения инфекции (ВПЧ выявляется более 1 года) – усиленная вирусная нагрузка, ассоциированная с повышенным риском тяжелой дисплазии, часто встречается при РШМ.
- Снижение вирусной нагрузки в 10 раз за 6 месяцев – транзиторная инфекция.
- Рост вирусной нагрузки через 6 и более месяцев после лечения указывает на возможность рецидива.
Важные замечания
- Инфицирование ВПЧ не всегда приводит к раку шейки матки.
- Возможно одновременное заражение несколькими генотипами ВПЧ.
- Результат анализа должен интерпретироваться с учетом заключений цитологического и гистологического исследований.
Также рекомендуется
- Human Papillomavirus 16/18 (HPV 16/18), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus 6/11 (HPV 6/11), ДНК [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
- Антиген плоскоклеточной карциномы (SCCA)
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог, педиатр, ЛОР.
Литература
- Arbyn M. et al. (2010). “European Guidelines for Quality Assurance in Cervical Cancer Screening. Second Edition–Summary Document”. Annals of Oncology 21 (3): 448–458.
- Hsiu-Ting Tsai, Ching-Hu Wu, Hsiao-Ling Lai, et al. Association between Quantitative High-Risk Human Papillomavirus DNA Load and Cervical Intraepithelial Neoplasm Risk Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2005;14:2544-2549.
- Saslow D, Solomon D, Lawson HW, et al. American Cancer Society, American Society for Colposcopy and Cervical Pathology, and American Society for Clinical Pathology Screening Guidelines for the Prevention and Early Detection of Cervical Cancer. Am J Clin Pathol. 2012;137:516-542.
- “Genital HPV Infection – CDC Fact Sheet”. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). April 10, 2008. Retrieved 13 November 2009.
- Материалы и рекомендации Противоракового Общества России. Режим доступа: https://www.pror.ru/
Источник
Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения.
Готовый анализ на ВПЧ выглядит в виде бланка, на котором указываются:
- Дата исследования. Она очень важна, поскольку концентрация ВПЧ часто оценивается в динамике. В этом случае самым важным фактором является рост концентрации вируса. Быстрое увеличение уровня ВПЧ гораздо опаснее слегка его повышенной концентрации, сохраняющейся в течение длительного времени. Поэтому результаты анализа надо сохранить.
- Номер пробирки, присваиваемый каждому образцу, поступающему в лабораторию.
- ФИО пациента и его пол.
- Данные врача и лаборатории, проводившей исследование.
Результат анализа выдается в виде таблицы, где указывается абсолютная и относительная концентрация каждого из вирусов и общая вирусная нагрузка. В нём обязательно указывается концентрация вирусов штаммов 16, 18 и 31, чаще всего вызывающих рак шейки матки, и остальных, которые предусмотрены данным методом исследования.
Пример бланка с результатами анализов на папилломавирус
Бланк анализа на ВПЧ
Абсолютная вирусная нагрузка – это количество вируса обнаруженного в образце. Если ВПЧ отсутствует или его концентрация не превышает клинически значимую, в бланке ставится пометка «вирус отсутствует» или «не обнаружен». Такая запись не означает, что возбудителя вообще нет в организме. Это маловероятно, поскольку папилломавирус встречается у 80% населения. Просто его концентрация недостаточна для развития рака шейки матки и других заболеваний.
Если абсолютное содержание ВПЧ превышает клинически значимое, напротив штамма вируса указывается его концентрация (вирусная нагрузка). Чем она выше, чем хуже результат.
Абсолютная вирусная нагрузка ВПЧ при поражениях шейки матки разной тяжести, копий/мл (геном-эквивалентов на 105 клеток эпителия человека). Таблица результатов
| Вирусная нагрузка | Поражение шейки матки | Показатель Lg (абсолютных копий) ВПЧ/10 5 клеток |
| Клинически малозначимая | от 103 до 105 | < 3 |
| Умеренная | 105–107 | 3 – 5 |
| Высокая | Более 107 | Более 5 |
Чем выше концентрация вирусов в мазке, тем существеннее риск возникновения болезней вызываемых папилломавирусом – злокачественных опухолей, бородавок, кондилом, папиллом, папилломатоза дыхательных путей.
В бланке указывается показатель КВМ – контроль взятия материала, характеризующий его качество. Нормальный показатель КВМ должен быть не менее 4. Его уменьшение говорит о нехватке нормального объема ДНК, необходимого для проведения исследования. При низком КВМ проводится повторное взятие материала.
Относительная нагрузка – отношение вирусной нагрузки к КВМ. Результат расшифровки показателя таблицы
| Относительная нагрузка | Расшифровка |
| «Не выявлено». | Вирус в организме не обнаружен или его концентрация невелика |
| Отрицательный показатель | Количество вирусов гораздо меньше числа здоровых клеток. Возбудитель находится в «спящем» состоянии или его концентрация снижается |
| Положительный показатель | Распространение инфекции или ее рецидив (возврат) после лечения. Это плохой результат анализа ВПЧ |
Общая вирусная нагрузка важна в случае, если имеется поражение несколькими возбудителями. Для подсчета суммируют все имеющиеся вирусные показатели.
По расшифровке результатов анализа, в котором выявлены те или иные типы ВПЧ, можно выявить, какое именно заболевание грозит пациенту.
Таблица расшифровки анализа на ВПЧ с вероятным диагнозом
| Заболевания | Штамм ВПЧ |
| Различные типы бородавок – обычные (вульгарные), юношеские (плоские), подошвенные (шипицы) | 1-4, 10, 26, 27 – 29, 49, 57 |
| Бородавки мясников (крупные бородавчатые наросты на теле) | 7 |
| Верруциформная эпидермодисплазия – заболевание, сопровождающееся появлением грубых толстых наростов на лице, теле и конечностях, напоминающих кору дерева | 2, 3, 5, 8-10-12, 14, 15, 18- 20, 36, 37, 46, 47, 50 |
| Кондиломы (генитальные бородавки) | 6, 11, 16, 18, 33, 39, 40, 42-43, 51-52 54-55, 57, 61-62, 64-67 |
| Дисплазия и рак шейки матки. Злокачественные опухоли анального канала прямой кишки | 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39-40, 42-43, 45, 50 – 52, 54-56 ,61- 62, 64, 66, 68 |
| Эпителиальная гиперплазия – заболевание, сопровождающееся появлением наростов на коже | 13, 32 |
| Папилломатоз дыхательных путей – разрастание полипов в носоглотке и трахее | 6,11,30 |
| Злокачественные опухоли лёгких и шеи | 2,6, 11, 16,18, 30 |
Как сделать интерпретацию результата анализов на ПЦР максимально точной
Для этого нужно сдать анализ с поверхности шейки матки на PAP-тест и пройти одно из ДНК исследований:
- ДНК-диагностика выявит вирус, его концентрацию и тип. Однако с её помощью невозможно узнать, начал ли вирус атаковать ткани шейки матки и насколько сильно такое поражение. Вирусная нагрузка даёт только косвенные сведения, поскольку развитие рака и других болезней зависит от иммунитета, состояния организма, сопутствующих заболеваний, типа вируса и других факторов. Поэтому даже низкая вирусная нагрузка не даст гарантию, что у пациентки не разовьется злокачественное новообразование шейки матки.
- PAP-тест выявит клетки, образующиеся при папилломавирусной инфекции. Это укажет на наличие вируса и факт его проникновения в ткани. Метод также покажет тяжесть поражения.
ДНК-диагностика
PAP-тест
Однако даже имея на руках результаты двух анализов, провести их интерпретацию самостоятельно практически невозможно. Для этого нужно провести осмотр пациентки и сопоставить картину состояния шейки с результатами диагностики. Это под силу только опытному врачу-гинекологу с хорошим багажом знаний и специальной аппаратурой. Поэтому, пытаясь самостоятельно расшифровать данные, можно пропустить опасное заболевание.
Для сдачи анализов на ВПЧ и их расшифровки нужно обратиться в Университетскую клинику.Здесь можно проверить состояние шейки матки с помощью видеокольпоскопа – прибора, позволяющего осмотреть ее поверхность вывести изображение на экран. Врачи клиники не только выявят наличие ВПЧ, но и проведут лечение вызванных им поражений-дисплазии, кондилом, папиллом.
Лечение проводится с помощью лазерных, радиоволновых, световых и других щадящих методов, минимальная травмирующих место удаления. После такой процедуры очень быстро восстанавливаются ткани, а на месте патологического очага не остаётся рубцов, стянутости и других остаточных явлений.
- Интерпретация результата анализов ВПЧ: расшифровка цитологии и гистологии
- Расшифровка анализа на ВПЧ: подробная интерпретация цитологического и гистологического анализов
- ДНК – анализы на ВПЧ
Поделиться ссылкой:
Источник