Пцр впч вкр суммарное количественное определение
Диагностирование ВПЧ осложняется вялым развитием процессов в молодом организме, которые часто не дают специфической симптоматики. Для выявления болезни на ранней стадии и профилактического контроля заболеваемости используют централизованный скрининг на ВПЧ ВКР.
Что такое скрининг ВПЧ ВКР
Скрининг – это целенаправленное обследование определенных групп населения с целью выявить заболевание. Скрининг проводится по специально разработанной методике подготовленным персоналом.
ВПЧ представляет собой заразные штаммы ДНК содержащего папилломавируса.
Все папилломавирусы (а их насчитывается больше сотни) делят на:
- высокоонкогенные штаммы – вирусы, которые способны вызвать дисплазию тканей кожи или слизистых человека, с последующим их злокачественным перерождением;
- низкоонкогенные – группа вирусов, деятельность которых вызывает доброкачественные образования (папилломы, бородавки).
Обратите внимание! Аббревиатура ВКР означает высокий канцерогенный риск. ВПЧ ВКР – так обозначают штаммы вируса, которые вызывают рак. У женщин это рак шейки матки, у мужчин – рак полового члена. Для Европейских жителей и населения России это 18, 16, 31 и 45 генотипы папилломавируса.
При активизации ВПЧ типа ВКР происходит изменение и перерождение тканей, которое оканчивается злокачественным процессом.
Скрининг на папилломавирусы высокой степени онкогенности проводят пошагово, по специально разработанной схеме:
- Проведение анализа цервикального мазка на предмет наличия или отсутствия измененных клеток (дисплазии) в организме пациента (ПАП тест).
- При положительной реакции на ПАП-тест проводят количественное определение вируса, его идентификацию (расширенный скрининг).
Фото 1: Скрининг на ВПЧ ВКР показан всем женщинам, начиная с 24 летнего возраста. Проводится должен при прохождении плановой диспансеризации населения, при профессиональных медосмотрах, по личному обращению пациентки. Источник: flickr (Eugene Evehealth).
Рекомендуемая периодичность мероприятия 1 раз в 3 года.
Обратите внимание! Скрининг позволяет снизить заболеваемость раком половых органов в сотни раз, что имеет важное значение при растущей тенденции заражения.
Показания для сдачи анализов
Показанием для сдачи анализов является:
- появление кондилом (иных новообразований) на половых органах, в анальной зоне или ротовой полости;
- выделения из половых органов неясной этиологии;
- личное беспокойство человека по поводу возможного заражения после незащищенного контакта;
- профилактический контроль.
Важность обследования
Важно! Выявление дисплазии тканей слизистых половых органов на ранней стадии имеет решающее значение при прогнозе эффективности терапии. Раннее выявление ВПЧ ВКР в организме позволяет принять превентивные терапевтические меры для его уничтожения.
От инфицирования до развития рака проходит от 5 до 15 лет. Выявление латентной формы присутствия вируса в организме дает:
- возможность динамического контроля состояния половых органов и деятельности вируса (вирусоносителям повторяют обследование ежегодно);
- возможность раннего лечения, когда прогноз наиболее благоприятен.
Статистика показывает, что рак шейки матки занимает 3 место среди онкологии половых органов женщины. Исследования причин развития онкопатологии матки подтверждают прямую связь между инфицированием ВПЧ ВКР и последующим развитием рака.
Фото 2: Каждая 8 из 10 женщин, перешагнувших 50-летний рубеж, заражена или переболела ВПЧ. Эта цифра увеличивается год от года в связи с все большей сексуальной активностью населения. Источник: flickr (Eugene Evehealth).
Виды скрининга на ВПЧ ВКР
Наиболее информативной и недорогой является методика скрининга, которая используется в России – исследование на цитологию позволяет на первом этапе «отсеять» здоровых обследуемых, дальнейшее исследование проводить только пациентам с выявленной дисплазией тканей.
Анализ на цитологию (ПАП-тест)
ПАП-тест это анализ по методике Папаниколау.
Этот вид тестирования отличает высокая точность анализа.
Для проведения анализа делается забор материала из цервикального канала шейки матки у женщин или уретры у мужчин. Процедура безболезненная, проводится в условиях обычного осмотра.
Материал помещается либо на стекло (уходящая практика), либо в специальную жидкостную среду, что удобнее для проведения исследования.
Жидкостный ПАП-тест берется специальной щеточкой, которая помещается в подготовленную жидкую среду для транспортировки и хранения. Такая методика забора и хранения биоматериала позволяет сохранить и проанализировать все клетки взятого эпителия.
Как подготовиться к процедуре
Для того, чтобы ПАП-тест был максимально достоверным следует соблюдать несколько условий:
- за 2 дня до посещения врача отказаться от половых контактов, спринцеваний, введения вагинальных медицинских средств;
- женщинам визит следует планировать в первой половине менструального цикла, но после полного окончания месячного кровотечения;
- исследование не проводят в период обострения хронических инфекций или остропротекающих заболеваний;
- исследование не проводят непосредственно после курса антибактериальной или противовоспалительной медикаментозной терапии.
Расширенный скрининг
Обратите внимание! Расширенный скрининг представляет собой контролируемый забор биоматериала для проведения анализа в режиме реального времени на определение не только наличия или отсутствия ВПЧ, но и типа, количества папиллома вируса человека онкогенной группы.
Анализ проводится методом ПЦР качественного направления на основе RT-PCR.
Данная методика позволяет интерпретировать результаты анализов для расшифровки по Дайджин-тесту. И корректировать дальнейшую тактику работы с пациентом.
Забор биоматериала не отличается от обычного взятия мазка. Требования по подготовке к расширенному тестированию такие же как и к ПАП-тесту:
- Воздержание от применения лекарственных средств влагалищных за 2 суток до;
- Воздержание на этот же период от половых контактов;
- Отсутствие менструального кровотечения.
ПЦР анализ
Анализ выявления ВПЧ с использованием полимерно-цепной реакции (ПЦР-тест) на его ДНК обладает высокой степенью достоверности. С его помощью можно определить:
- факт инфицирования;
- генотип папилломавируса;
- степень распространения (количественный анализ).
Анализ возможен на любой жидкости из организма пациента: кровь, слизистое отделяемое, моча.
Подготовка
- Женщинам не следует сдавать биоматериал из влагалища во время менструации;
- Мужчинам запрещено мочиться за 1,5 часа до процедуры;
- Кровь сдают на голодный желудок;
- При заборе материала из половых органов женщинам запрещено спринцеваться накануне вечером;
- Исключаются любые медикаменты за 2 дня до проведения забора биоматериала.
Результаты анализов
- Тест по Папаниколау (ПАП-тест) может быть отрицательным (измененные клетки не обнаружены) или положительным (во взятом образце обнаружены онкоклетки);
- ПЦР-тест показывает наличие или отсутствие ВПЧ;
- Расширенный скрининг определяет тип вируса и его количество.
Количественный результат по Дайджин-тесту интерпретируется:
- менее 3 Lg – концентрация вируса незначительная;
- от 3 Lg до 5 Lg – средняя степень присутствия;
- более 5 Lg – высокая концентрация ВПЧ.
Источник
В современной медицине важную роль в диагностике заболеваний играет лабораторная диагностика. Развитие современной науки, химии, познаний о человеческом организме и свойстве всевозможных биологически активных соединений позволяют проводить высокоточную диагностику, используя буквально капли крови или даже обычные соскобы с кожи и слизистых. При диагностике ВПЧ количественный анализ поможет определить какие штаммы вируса присутствуют в организме, на сколько они активны в данный момент жизни человека.
Что такое количественный анализ ВПЧ
Количественное определение ВПЧ направлено на выявление присутствия в организме человека определенных видов вируса, степени их активности. Эти показатели являются ведущими при определении того, какие виды папилломавируса поразили пациента, уровня их онкогенности, необходимости лечения. Вирус папилломы человека невозможно полностью уничтожить после заражения, но существует масса способов максимально снизить его активность. В связи с этим люди, страдающие постоянными проявлениями вируса должны периодически проходить обследование на наличие опасных штаммов инфекционного агента, определение их активности. В противном случае не представляется возможным четко отслеживать и контролировать ситуацию, заболевание пускается на самотек, что может привести к не самым лучшим последствиям.
Современные методики позволяют несколькими путями определить количество и типы ВПЧ в организме. Среди них чаще всего используются:
- Определение наличия антител к вирусу. Антитела – специфические белки иммунной системы. Против каждого инфекционного агента, попавшего в организм, вырабатываются полностью уникальные антитела (иммуноглобулины). Эти иммуноглобулины подходят к белкам вирусов и бактерий, как ключ к замку. Зная эту особенность в лабораторных условиях к сыворотке исследуемой крови добавляют вирусные белки. Если происходит химическая реакция, то говорят о положительном результате – в сыворотке найдены антитела против данного вируса, что свидетельствует о его наличии в организме. Сделать можно практически в любой больнице.
- Digene-тест. Специфическая методика, разработанная одноименной корпорацией. Сущность метода базируется на выявлении 18 типов наиболее высоконкогенных вирусов папилломы человека. Для теста используются биологические жидкости, биоптаты. В исследуемый материал добавляются специальные флуоресцентные вещества, связывающиеся с вирусной ДНК. Если после проведения анализ в исследуемом материале выявляется флуоресценция – это свидетельствует о наличии того или иного вида папилломавируса.
- Полимеразная цепная реакция (ПЦР). «Золотой стандарт» диагностики папилломной инфекции. Метод основан на искусственном увеличении количества копий вирусной ДНК в исследуемом материале. Благодаря этому наличие даже единичных вирусов во взятых материалах будет определено с высокой точностью.
Как проводят анализ
Для проведения количественного анализа на ВПЧ могут использовать следующие материалы:
- Капиллярная кровь (из пальца). Довольно распространенная методика забора биологического материала. Очень часто используется при проведении нескольких анализов, направленных на выявление иных инфекций, биохимических показателей крови.
- Соскобы с кожи или слизистых. Абсолютно безболезненная методика, при которой ватной палочкой или специальным шпателем аккуратно забирают верхние слои эпителия. Забор материала происходит в пораженной области, что увеличивает информативность метода.
- Биоптаты тканей. Очень часто, особенно при подозрении на развитие злокачественного новообразования производится особая диагностическая процедура – биопсия. При этом забирается часть поражённой ткани, после чего она подвергается исследованию под микроскопом и, если того требует клинический случай, — лабораторной диагностике на предмет наличия вирусных ДНК или специфических опухолевых белков.
Тенденцией современной медицины является стремление к максимальной безболезненности проводимых процедур. В связи с этим, наибольшего распространения достигли методики диагностики, способные работать с соскобами поверхности эпителия. В отдельных случаях – используется взятие капиллярной крови. Биопсия применяется только в крайних, труднодиагностируемых случаях.
Рекомендуем почитать:
- Кератопапиллома
- Салициловая кислота от бородавок
- Чем отличается папиллома от бородавки
К диагностике и определению типов ВПЧ прибегают в тех случаях, когда происходит поражение папилломами половых органов (особенно шейки матки), появляются подозрения на возможное развитие злокачественных опухолей из ранее доброкачественных наростов, массивной папилломной инфекции, склонной к частым рецидивам.
Перед сдачей анализов следует пройти определенную подготовку:
- Не принимать в течении 12 часов перед процедурой противогрибковых, противомикробных и противовирусных средств.
- В день перед сдачей анализов принять душ, вымыться, очистить исследуемую область от волосяного покрова.
- Воздержаться от полового акта в течении 2 – 3 дней перед проведение диагностической процедуры.
Расшифровка анализа ПЦР
Люди, которые сделали анализ ПЦР, являющийся оптимальным среди всех методов диагностики, через несколько дней получают его результаты, которые могут интерпретировать как специалисты, так и сами пациенты. Исследование проводится сразу для нескольких типов ВПЧ, которые наиболее вероятны у данного больного и наиболее опасны с точки зрения прогноза развития онкологических заболеваний.
Среди всех ВПЧ наиболее опасными принято считать типы, вызывающие остроконечные кондиломы или предраковые состояния: 6, 11, 13, 18, 30, 31, 42, 43, 57 – 59, 67, 70. Именно их ДНК ищется в исследуемых образцах биологических материалов, взятых на диагностику. Если геном данных типов вирусов обнаружен, то ставится «+» — тест положителен. В зависимости от количества выявленных ДНК могут различать слабоположительные результаты («+»), умеренно положительные («++»), явно положительные («+++»). Помимо этого, существует Lg система оценки концентрации вирусов в организме, которая обозначается как: Lg 1 – 3 – малая концентрация вирусных частиц, Lg 4 – 5 – клинически значимые показатели, Lg 6 и выше – крайне высокое содержание ВПЧ в организме.
Окончательную интерпретацию анализов должен проводить практикующий врач, который будет обращать внимание на лабораторные данные и на клинические проявления. В противном случае возможна ложная трактовка результатов.
Что дают результаты анализа?
Проведение любых анализов – возможность подвести любые симптомы и нарушения в организме под цифровые показатели. Это значительно облегчает не только трактовку субъективных изменений в теле человека, но и позволяет более точно подобрать лечение в конкретно рассматриваемом случае.
Если после сдачи анализов на наличие онкогенных типов вируса папилломы человека пришли отрицательные результаты, то дальнейшие действия зависят сугубо от вашего желания. Если вас беспокоят проявления папилломной инфекции, то можете в любой момент начать их лечение как консервативно, так и с использование активной тактики, направленной на удаление наростов.
В случае, когда тест оказался положительным ситуация становится несколько неоднозначнее. При слабоположительных результатах и отсутствии клинически значимых проявлений лечение может быть нецелесообразно. Это связано с тем, что если на теле не обнаружено наростов, то нет точки, на которую могут воздействовать современные лечебные мероприятия.
Когда анализы умеренно или выражено положительны, то в большинстве случаев имеются проявления инфекции в виде папиллом или полипов. Если при этом выявляются онкогенные виды вируса, то лечение необходимо начинать как можно скорее. Оно должно быть направлено на полное удаление всех бородавок на теле с целью максимальной профилактики их перерождения в злокачественные новообразования.
Статья проверена редакцией
Не нашли подходящий совет?
Задайте вопрос эксперту
или смотрите все вопросы…
Источник
Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения.
Готовый анализ на ВПЧ выглядит в виде бланка, на котором указываются:
- Дата исследования. Она очень важна, поскольку концентрация ВПЧ часто оценивается в динамике. В этом случае самым важным фактором является рост концентрации вируса. Быстрое увеличение уровня ВПЧ гораздо опаснее слегка его повышенной концентрации, сохраняющейся в течение длительного времени. Поэтому результаты анализа надо сохранить.
- Номер пробирки, присваиваемый каждому образцу, поступающему в лабораторию.
- ФИО пациента и его пол.
- Данные врача и лаборатории, проводившей исследование.
Результат анализа выдается в виде таблицы, где указывается абсолютная и относительная концентрация каждого из вирусов и общая вирусная нагрузка. В нём обязательно указывается концентрация вирусов штаммов 16, 18 и 31, чаще всего вызывающих рак шейки матки, и остальных, которые предусмотрены данным методом исследования.
Пример бланка с результатами анализов на папилломавирус
Бланк анализа на ВПЧ
Абсолютная вирусная нагрузка – это количество вируса обнаруженного в образце. Если ВПЧ отсутствует или его концентрация не превышает клинически значимую, в бланке ставится пометка «вирус отсутствует» или «не обнаружен». Такая запись не означает, что возбудителя вообще нет в организме. Это маловероятно, поскольку папилломавирус встречается у 80% населения. Просто его концентрация недостаточна для развития рака шейки матки и других заболеваний.
Если абсолютное содержание ВПЧ превышает клинически значимое, напротив штамма вируса указывается его концентрация (вирусная нагрузка). Чем она выше, чем хуже результат.
Абсолютная вирусная нагрузка ВПЧ при поражениях шейки матки разной тяжести, копий/мл (геном-эквивалентов на 105 клеток эпителия человека). Таблица результатов
| Вирусная нагрузка | Поражение шейки матки | Показатель Lg (абсолютных копий) ВПЧ/10 5 клеток |
| Клинически малозначимая | от 103 до 105 | < 3 |
| Умеренная | 105–107 | 3 – 5 |
| Высокая | Более 107 | Более 5 |
Чем выше концентрация вирусов в мазке, тем существеннее риск возникновения болезней вызываемых папилломавирусом – злокачественных опухолей, бородавок, кондилом, папиллом, папилломатоза дыхательных путей.
В бланке указывается показатель КВМ – контроль взятия материала, характеризующий его качество. Нормальный показатель КВМ должен быть не менее 4. Его уменьшение говорит о нехватке нормального объема ДНК, необходимого для проведения исследования. При низком КВМ проводится повторное взятие материала.
Относительная нагрузка – отношение вирусной нагрузки к КВМ. Результат расшифровки показателя таблицы
| Относительная нагрузка | Расшифровка |
| «Не выявлено». | Вирус в организме не обнаружен или его концентрация невелика |
| Отрицательный показатель | Количество вирусов гораздо меньше числа здоровых клеток. Возбудитель находится в «спящем» состоянии или его концентрация снижается |
| Положительный показатель | Распространение инфекции или ее рецидив (возврат) после лечения. Это плохой результат анализа ВПЧ |
Общая вирусная нагрузка важна в случае, если имеется поражение несколькими возбудителями. Для подсчета суммируют все имеющиеся вирусные показатели.
По расшифровке результатов анализа, в котором выявлены те или иные типы ВПЧ, можно выявить, какое именно заболевание грозит пациенту.
Таблица расшифровки анализа на ВПЧ с вероятным диагнозом
| Заболевания | Штамм ВПЧ |
| Различные типы бородавок – обычные (вульгарные), юношеские (плоские), подошвенные (шипицы) | 1-4, 10, 26, 27 – 29, 49, 57 |
| Бородавки мясников (крупные бородавчатые наросты на теле) | 7 |
| Верруциформная эпидермодисплазия – заболевание, сопровождающееся появлением грубых толстых наростов на лице, теле и конечностях, напоминающих кору дерева | 2, 3, 5, 8-10-12, 14, 15, 18- 20, 36, 37, 46, 47, 50 |
| Кондиломы (генитальные бородавки) | 6, 11, 16, 18, 33, 39, 40, 42-43, 51-52 54-55, 57, 61-62, 64-67 |
| Дисплазия и рак шейки матки. Злокачественные опухоли анального канала прямой кишки | 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39-40, 42-43, 45, 50 – 52, 54-56 ,61- 62, 64, 66, 68 |
| Эпителиальная гиперплазия – заболевание, сопровождающееся появлением наростов на коже | 13, 32 |
| Папилломатоз дыхательных путей – разрастание полипов в носоглотке и трахее | 6,11,30 |
| Злокачественные опухоли лёгких и шеи | 2,6, 11, 16,18, 30 |
Как сделать интерпретацию результата анализов на ПЦР максимально точной
Для этого нужно сдать анализ с поверхности шейки матки на PAP-тест и пройти одно из ДНК исследований:
- ДНК-диагностика выявит вирус, его концентрацию и тип. Однако с её помощью невозможно узнать, начал ли вирус атаковать ткани шейки матки и насколько сильно такое поражение. Вирусная нагрузка даёт только косвенные сведения, поскольку развитие рака и других болезней зависит от иммунитета, состояния организма, сопутствующих заболеваний, типа вируса и других факторов. Поэтому даже низкая вирусная нагрузка не даст гарантию, что у пациентки не разовьется злокачественное новообразование шейки матки.
- PAP-тест выявит клетки, образующиеся при папилломавирусной инфекции. Это укажет на наличие вируса и факт его проникновения в ткани. Метод также покажет тяжесть поражения.
ДНК-диагностика
PAP-тест
Однако даже имея на руках результаты двух анализов, провести их интерпретацию самостоятельно практически невозможно. Для этого нужно провести осмотр пациентки и сопоставить картину состояния шейки с результатами диагностики. Это под силу только опытному врачу-гинекологу с хорошим багажом знаний и специальной аппаратурой. Поэтому, пытаясь самостоятельно расшифровать данные, можно пропустить опасное заболевание.
Для сдачи анализов на ВПЧ и их расшифровки нужно обратиться в Университетскую клинику.Здесь можно проверить состояние шейки матки с помощью видеокольпоскопа – прибора, позволяющего осмотреть ее поверхность вывести изображение на экран. Врачи клиники не только выявят наличие ВПЧ, но и проведут лечение вызванных им поражений-дисплазии, кондилом, папиллом.
Лечение проводится с помощью лазерных, радиоволновых, световых и других щадящих методов, минимальная травмирующих место удаления. После такой процедуры очень быстро восстанавливаются ткани, а на месте патологического очага не остаётся рубцов, стянутости и других остаточных явлений.
- Интерпретация результата анализов ВПЧ: расшифровка цитологии и гистологии
- Расшифровка анализа на ВПЧ: подробная интерпретация цитологического и гистологического анализов
- ДНК – анализы на ВПЧ
Поделиться ссылкой:
Источник