Пцр антитела к впч

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Общие сведения

Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:  

• наличие ВПЧ;
• штаммы, которыми инфицирован больной;
• количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом.  ВПЧ распространяется следующими путями:

• при незащищенных половых контактах;
• при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
• контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
• во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.  

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

1. Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
2. Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
3. Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
4. Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

• собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
• нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
• реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения. 

Как сдают анализ женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику. 

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Расшифровка анализа ПЦР

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

• Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
• Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
• Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Папилломавирусы человека – это группа вирусов, поражающих эпителиальные ткани, особенно часто – кожу и слизистые оболочки. Передаются возбудители контактным путем, наиболее часто – половым, поэтому от ВПЧ страдают как мужчины, так и женщины.

Вирусы папилломы человека вызывают появление различных новообразований на коже и слизистых. «Делом рук» ВПЧ являются:

• вульгарные и плоские бородавки;
• подошвенные бородавки (шипицы);
• остроконечные и плоские кондиломы;
• папилломы;
• бовеноидный папулез.

Кроме того, ВЧ приводит к формированию неоплазий шейки матки.

Все эти явления неприятны, но не смертельны. Любые дефекты кожи и слизистых оболочек сегодня легко лечатся простым удалением. Но опасность состоит в том, что некоторые подтипы ВПЧ онкогенны – то есть со временем вызываемые ими новообразования могут озлокачествляться.

Точная диагностика – первый этап полноценного лечения, поэтому так важно сдавать анализы, назначенные врачом. В данной статье рассмотрим, в каких ситуациях сдается кровь на ВПЧ.

Показания к сдаче анализов на ВПЧ

ВПЧ – одна из самых распространенных на сегодня инфекций, передаваемых половым путем. Все дело в том, что презервативы недостаточно надежно защищают от нее. Кондиломы или папилломы могут находиться и вне той области, которая закрывается кондомом, а слизистые оболочки весьма уязвимы перед вирусом из-за отсутствия защищающего рогового слоя. Нередок и орально-генитальный путь передачи инфекции.

Зачастую ВПЧ успешно подавляется иммунной системой и не вызывает вообще никаких клинических проявлений. В то же время не всегда изменения, которые вызывает вирус, видны невооруженным взглядом. Бывает, что на коже нет наростов, но поражены слизистые оболочки. Беспокойство должны вызывать следующие симптомы:

• боль при половом акте, мажущие кровяные выделения у женщин после ПА или спринцевания;
• жжение и боль в мочеиспускательном канале у мужчин;
• боль в области ануса при дефекации, ощущение инородного тела в прямой кишке;
• бесплодие, невынашивание беременности.

При этих симптомах или при появлении кондилом, папиллом в области промежности, на половых органах нужно обратиться к врачу. Женщине – к гинекологу, мужчине – к урологу. Сдать анализы на ВПЧ рекомендуется и в том случае, если он обнаружен у полового партнера, даже при отсутствии жалоб.

Какие анализы сдают на ВПЧ

Поскольку вирус папилломы человека тропен к тканям эпителия, для его выявления обычно берут соскоб со слизистой оболочки. У мужчин – из уретры, у женщин – из цервикального канала. Иногда – из ротоглотки, со слизистой прямой кишки. Полученный материал отправляют на исследование методом полимеразно-цепной реакции (ПЦР). Это позволяет с высокой точностью обнаружить генетический материал вируса в тканях.

Для начала делается качественный ПЦР анализ, который определяет только наличие или отсутствие вируса с высокой онкогенностью без уточнения типа (выявляется совокупно группа). Чтобы уточнить анализ, проводится ПЦР с генотипированием, в этом случае можно точно установить, какой тип именно вируса находится в организме.

Количественный метод (ПЦР в режиме реального времени) применяется, чтобы выяснить вирусную нагрузку, то есть концентрацию определенного типа ВПЧ в тканях эпителия. Здесь возможны три варианта:

• Lg менее 3 – клинически незначимая нагрузка;
• Lg от 3 до 5 – нагрузка умеренная, есть риск перерождения тканей;
• Lg более 5 – высокая нагрузка и риск озлокачествления.

Кроме методики полимеразно-цепной реакции, используется метод гибридного захвата (digene-тест). Хорош тем, что дает сразу и качественные, и количественные результаты. Позволяет точно определить штамм и вирусную нагрузку. Единственный минус – высокая стоимость исследования. Для этого теста также используются эпителиальные клетки, полученные путем соскоба.

Другой путь обнаружения ВПЧ у женщин – морфологический. Для этого используется цитологический мазок (ПАП-тест) – клетки, нанесенные на предметное стекло, изучаются в лаборатории. Обнаружение в диагностическом материале измененных клеток – койлоцитов и дискератоцитов – говорит о заражении. Но для точного диагноза всегда назначается ПЦР анализ.

Возникает вопрос, а можно ли определить ВПЧ в крови? Берут ли анализы крови на ВПЧ?

Антитела к ВПЧ в крови

Действительно, папилломавирусную инфекцию можно обнаружить и по анализу крови, однако исследование этого биоматериала диагностически менее значимо. Почему? Потому что присутствие ВПЧ в организме не обязательно означает развитие инфекции. Только его обнаружение в эпителиальных тканях означает, что вирус на самом деле достиг клинически значимой концентрации и поразил организм.

Папилломавирус в крови определяют по результатам иммуноферментного анализа. ИФА – это современная лабораторная методика исследования крови. Она очень чувствительна, поэтому дает достаточно точные результаты – более 90%. Принцип методики основан на обнаружении в крови человека антител к какому-либо инфекционному возбудителю – в данном случае – к вирусу папилломы человека.

Понятно, что ВПЧ в данном случае находят косвенным путем – по «следу» антител, которые вырабатывает против его вторжения иммунная система. При этом выяснить, какой именно штамм вызвал реакцию, невозможно, поэтому ИФА не позволяет выявить онкогенность возбудителя. В принципе, она показывает только состоявшийся «контакт» с вирусом, который иммунная система вполне могла уже успешно подавить.

Правильно интерпретировать результаты ИФА сложно даже специалисту, поскольку специфические антитела к ВПЧ обнаруживаются в анализах гораздо дольше, чем при других инфекциях.

Более того, из-за особенностей жизненного цикла вируса (он производит малое количество вирусного белка и, соответственно, вызывает слабую реакцию клеток крови), иммунная система организма может и не включить защиту от «вторжения», поэтому антитела вырабатываться не будут.

Все это делает затруднительным прогнозирование иммунного ответа на ВПЧ и исход заболевания у конкретного человека. Поэтому можно сказать, что иммуноферментный анализ отлично иллюстрирует протекание многих инфекций в организме, но именно в случае с ВПЧ он не слишком информативен и в основном используется для постановки предварительного диагноза. Например, при обнаружении ВПЧ у женщины ее партнеру могут предложить сделать анализ крови, чтобы выяснить, стоит ли ему проходить углубленное обследование.

Важно! По результатам ИФА не ставится окончательный диагноз и не назначается лечение – он имеет лишь вспомогательное значение. Расшифровка результатов анализа проводится только квалифицированным специалистом в совокупности с показаниями остальных исследований.

Как подготовиться к сдаче анализа

На анализ берут венозную кровь, ее сдают утром натощак. Никакой особой предварительной подготовки не требуется, есть только общие рекомендации:

• не принимать алкоголь, не переедать и не злоупотреблять жирной пищей накануне;
• поберечь себя, ограничив физическую и эмоциональную нагрузку;
• прекратить противовирусное лечение не менее чем за две недели (этот вопрос решается с лечащим врачом).

Итак, при диагностике ВПЧ главное – это сдать мазок, а анализ крови может применяться как дополнительный метод исследования.

Видео в тему