Определение днк впч 16 как
Тест ДНК ВПЧ – это метод, который позволяет точно определить наличие вируса HPV (папилломы человека). HPV отвечает за развитие раковых заболеваний, в частности, шейки матки. В отличие от традиционной цитологии, исследование позволит обнаружить ВПЧ на самом раннем этапе развития инфекции, а также в ситуации, когда протекает она бессимптомно.
Если результат теста на ДНК ВПЧ положительный, это не эквивалентно онкологическому заболеванию, однако, является показанием для проведения регулярной диагностики.
Что такое HPV?
HPV (папилломавирус) широко присутствует в мировой популяции, особенно среди молодых людей. По оценкам Всемирной Организации Здравоохранения, около 80% людей в возрастной категории 19-45 лет имели контакт с этой инфекцией. Наиболее серьезным последствием заражения папилломавирусом является рак.
Почти в 100 процентах случаев причиной злокачественного поражения шейки матки является предшествующее инфицирование вирусом HPV. Несмотря на то что о вирусе папилломы говорят чаще всего в контексте рака у женщин, мужчины также находятся в опасности. Они не являются только носителями вируса – в основе 90 процентов диагнозов рака прямой кишки и 40 процентов рака полового члена лежит присутствие инфицирования вирусом HPV.
Как можно заразиться HPV?
Этот вирус передается путем половых контактов или использования общих предметов личной гигиены. Возможна также передача вируса от матери к ребенку во время родов. Из 200 серотипов ВПЧ, эти характеризуются как неонкогенные (6, 11, 13, 30, 40, 42, 43 и 44), вызывают возникновение кондилом.
Эти поражения кожи, локализованные на коже половых губ и шейке матки (для женщин) или на пенисе, мошонке и прямой кишке у мужчин, принимают характер отдельных или сливающихся форм, очень напоминающих цветную капусту.
Некоторые остроконечные кондиломы уничтожаются самопроизвольно (под воздействие защитных сил организма), остальные необходимо как можно скорее удалить, так как они являются источником заражения последующих сексуальных партнеров.
ВПЧ и рак – кто подвержен раку?
Гораздо более опасные последствия несет в себе инфекция типами канцерогенных вирусов – 16, 18, 31, 33 и 45. Сам факт заражения не однозначен, но доказано, что HPV повышает риск его возникновения. Решающее значение для начала процесса развития неоваскуляризации имеет наличие так называемых кофакторов, то есть факторов, сопровождающих.
Основные из них это:
- курение табака;
- ранний период сексуальной инициации;
- частая смена партнеров;
- не использование презервативов;
- ослабление иммунитета;
- пероральная гормональная контрацепция;
- сосуществование заболеваний: ВИЧ-инфекции, Хламидий (Chlamydia trachomatis) и герпеса.
Тест на ДНК вируса HPV – показания
Ежегодно раком шейки матки заболевает более 500 тысяч женщин. К сожалению, многие из них умирают. Наличие HPV обнаруживается в 100% случаев инвазивного рака шейки матки, в 75% предракового состояния и в 15 % точных результатов цитологического исследования. Молекулярная диагностика инфекции может быть очень эффективным инструментом диагностики раковых заболеваний в первом триместре беременности.
В настоящий момент профилактическая программа основана на скрининге с цитологией. Это предоставляет возможность обнаружить только дополнительные изменения, которые развиваются через несколько десятков лет после заражения.
Когда сделать тест на HPV?
Показания для исследования ДНК HPV следующие:
- рецидивирующие инфекции половых путей (уретры, головки полового члена или крайней плоти);
- рецидивирующие генитальные бородавки;
- планируется беременность;
- наличие эрозий и генитальных бородавок у родственников;
- использование пероральной гормональной контрацепции в течение нескольких лет;
- неоднозначный результат теста Папаниколау.
Тест ДНК HPV должен выполнять ежегодно каждый человек, который активен в сексуальном плане. Стоит помнить, что выполнение теста имеет смысл у лиц после 30 лет. У молодых людей инфекции ВПЧ обычно имеют преходящий характер. Инфекция исчезает самопроизвольно, не приводя к серьезным последствиям для здоровья, поэтому исследование не обязательно, но может быть рекомендовано в отдельных случаях.
Как проводится тестирование на ДНК HPV?
У многих пациенток есть сомнения в том, как правильно сделать тест на ВПЧ. Первым этапом испытаний является получение подходящего материала для исследований. Как подготовиться к исследованию ДНК вируса HPV?
Пациентка не должна идти на диагностику во время менструации, оптимальное время – это, по крайней мере, два дня после прекращения кровотечения. Не допускается ирригация или применение любых вагинальных препаратов за двое суток перед проведением исследования, а в течение 24 ч до него необходимо воздержаться от половых отношений.
Получение материала для анализа, заключается в выполнении мазка с шейки матки при помощи цитощетки которую врач вводит в устье канала шейки матки и пять раз поворачивает вокруг своей оси.
У мужчин материал получают при помощи соскоба из уретры. Процедура взятия биоматериала на анализ ДНК HPV не болезненна.
Суть теста на ДНК – применение метода полимеразной цепной реакции ПЦР (PCR), которая заключается в транслировании большого количества копий ДНК, что позволяет обнаруживать даже незначительные количества фрагментов нуклеиновой кислоты.
Для тестирования на ДНК ВПЧ возможна идентификация нескольких десятков типов вирусов. Анализ ДНК HPV позволяет обнаружить больше четырнадцати генотипов высокого риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 58, 59, 66, 68. Важное значение имеет выявление ВПЧ типов 16 и 18, как высокоонкогенных.
Как интерпретировать результат теста ДНК HPV – расшифровка анализа
Время ожидания результата исследования ДНК ВПЧ составляет 7-10 рабочих дней. Получение положительного результата теста на ДНК ВПЧ подтверждает на 100% присутствие нуклеиновой кислоты вируса папилломы в анализируемом материале. Нужно сказать, что, это не означает неизбежного развития рака шейки матки, а только указывает на принадлежность к группе высокого риска, что не менее важно для предупреждения развития онкологии.
Подтверждение типа ВПЧ 16 и 18 требует обязательного проведения кольпоскопии, независимо от результата мазка папаниколау.
Если результат теста указывает на наличие других онкогенных типов, в обязательном порядке необходимо проведение цитологического исследования.
Повторный тест ДНК HPV проводится через год. Отрицательный результат анализа ДНК вируса HPV указывает на незначительный риск развития злокачественного поражения шейки матки, по крайней мере, в ближайшие несколько лет.
Поделиться ссылкой:
Источник
Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения.
Готовый анализ на ВПЧ выглядит в виде бланка, на котором указываются:
- Дата исследования. Она очень важна, поскольку концентрация ВПЧ часто оценивается в динамике. В этом случае самым важным фактором является рост концентрации вируса. Быстрое увеличение уровня ВПЧ гораздо опаснее слегка его повышенной концентрации, сохраняющейся в течение длительного времени. Поэтому результаты анализа надо сохранить.
- Номер пробирки, присваиваемый каждому образцу, поступающему в лабораторию.
- ФИО пациента и его пол.
- Данные врача и лаборатории, проводившей исследование.
Результат анализа выдается в виде таблицы, где указывается абсолютная и относительная концентрация каждого из вирусов и общая вирусная нагрузка. В нём обязательно указывается концентрация вирусов штаммов 16, 18 и 31, чаще всего вызывающих рак шейки матки, и остальных, которые предусмотрены данным методом исследования.
Пример бланка с результатами анализов на папилломавирус
Бланк анализа на ВПЧ
Абсолютная вирусная нагрузка – это количество вируса обнаруженного в образце. Если ВПЧ отсутствует или его концентрация не превышает клинически значимую, в бланке ставится пометка «вирус отсутствует» или «не обнаружен». Такая запись не означает, что возбудителя вообще нет в организме. Это маловероятно, поскольку папилломавирус встречается у 80% населения. Просто его концентрация недостаточна для развития рака шейки матки и других заболеваний.
Если абсолютное содержание ВПЧ превышает клинически значимое, напротив штамма вируса указывается его концентрация (вирусная нагрузка). Чем она выше, чем хуже результат.
Абсолютная вирусная нагрузка ВПЧ при поражениях шейки матки разной тяжести, копий/мл (геном-эквивалентов на 105 клеток эпителия человека). Таблица результатов
| Вирусная нагрузка | Поражение шейки матки | Показатель Lg (абсолютных копий) ВПЧ/10 5 клеток |
| Клинически малозначимая | от 103 до 105 | < 3 |
| Умеренная | 105–107 | 3 – 5 |
| Высокая | Более 107 | Более 5 |
Чем выше концентрация вирусов в мазке, тем существеннее риск возникновения болезней вызываемых папилломавирусом – злокачественных опухолей, бородавок, кондилом, папиллом, папилломатоза дыхательных путей.
В бланке указывается показатель КВМ – контроль взятия материала, характеризующий его качество. Нормальный показатель КВМ должен быть не менее 4. Его уменьшение говорит о нехватке нормального объема ДНК, необходимого для проведения исследования. При низком КВМ проводится повторное взятие материала.
Относительная нагрузка – отношение вирусной нагрузки к КВМ. Результат расшифровки показателя таблицы
| Относительная нагрузка | Расшифровка |
| «Не выявлено». | Вирус в организме не обнаружен или его концентрация невелика |
| Отрицательный показатель | Количество вирусов гораздо меньше числа здоровых клеток. Возбудитель находится в «спящем» состоянии или его концентрация снижается |
| Положительный показатель | Распространение инфекции или ее рецидив (возврат) после лечения. Это плохой результат анализа ВПЧ |
Общая вирусная нагрузка важна в случае, если имеется поражение несколькими возбудителями. Для подсчета суммируют все имеющиеся вирусные показатели.
По расшифровке результатов анализа, в котором выявлены те или иные типы ВПЧ, можно выявить, какое именно заболевание грозит пациенту.
Таблица расшифровки анализа на ВПЧ с вероятным диагнозом
| Заболевания | Штамм ВПЧ |
| Различные типы бородавок – обычные (вульгарные), юношеские (плоские), подошвенные (шипицы) | 1-4, 10, 26, 27 – 29, 49, 57 |
| Бородавки мясников (крупные бородавчатые наросты на теле) | 7 |
| Верруциформная эпидермодисплазия – заболевание, сопровождающееся появлением грубых толстых наростов на лице, теле и конечностях, напоминающих кору дерева | 2, 3, 5, 8-10-12, 14, 15, 18- 20, 36, 37, 46, 47, 50 |
| Кондиломы (генитальные бородавки) | 6, 11, 16, 18, 33, 39, 40, 42-43, 51-52 54-55, 57, 61-62, 64-67 |
| Дисплазия и рак шейки матки. Злокачественные опухоли анального канала прямой кишки | 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 39-40, 42-43, 45, 50 – 52, 54-56 ,61- 62, 64, 66, 68 |
| Эпителиальная гиперплазия – заболевание, сопровождающееся появлением наростов на коже | 13, 32 |
| Папилломатоз дыхательных путей – разрастание полипов в носоглотке и трахее | 6,11,30 |
| Злокачественные опухоли лёгких и шеи | 2,6, 11, 16,18, 30 |
Как сделать интерпретацию результата анализов на ПЦР максимально точной
Для этого нужно сдать анализ с поверхности шейки матки на PAP-тест и пройти одно из ДНК исследований:
- ДНК-диагностика выявит вирус, его концентрацию и тип. Однако с её помощью невозможно узнать, начал ли вирус атаковать ткани шейки матки и насколько сильно такое поражение. Вирусная нагрузка даёт только косвенные сведения, поскольку развитие рака и других болезней зависит от иммунитета, состояния организма, сопутствующих заболеваний, типа вируса и других факторов. Поэтому даже низкая вирусная нагрузка не даст гарантию, что у пациентки не разовьется злокачественное новообразование шейки матки.
- PAP-тест выявит клетки, образующиеся при папилломавирусной инфекции. Это укажет на наличие вируса и факт его проникновения в ткани. Метод также покажет тяжесть поражения.
ДНК-диагностика
PAP-тест
Однако даже имея на руках результаты двух анализов, провести их интерпретацию самостоятельно практически невозможно. Для этого нужно провести осмотр пациентки и сопоставить картину состояния шейки с результатами диагностики. Это под силу только опытному врачу-гинекологу с хорошим багажом знаний и специальной аппаратурой. Поэтому, пытаясь самостоятельно расшифровать данные, можно пропустить опасное заболевание.
Для сдачи анализов на ВПЧ и их расшифровки нужно обратиться в Университетскую клинику.Здесь можно проверить состояние шейки матки с помощью видеокольпоскопа – прибора, позволяющего осмотреть ее поверхность вывести изображение на экран. Врачи клиники не только выявят наличие ВПЧ, но и проведут лечение вызванных им поражений-дисплазии, кондилом, папиллом.
Лечение проводится с помощью лазерных, радиоволновых, световых и других щадящих методов, минимальная травмирующих место удаления. После такой процедуры очень быстро восстанавливаются ткани, а на месте патологического очага не остаётся рубцов, стянутости и других остаточных явлений.
- Интерпретация результата анализов ВПЧ: расшифровка цитологии и гистологии
- Расшифровка анализа на ВПЧ: подробная интерпретация цитологического и гистологического анализов
- ДНК – анализы на ВПЧ
Поделиться ссылкой:
Источник
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток урогенитального тракта
Качественное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV) высокого онкогенного риска двух типов (16, 18) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Вирус папилломы человека (ВПЧ, Human papillomavirus, HPV) относится к малым ДНК-содержащим вирусам, которые инфицируют эпителиальные клетки и индуцируют пролиферативные поражения кожи и слизистых оболочек. В настоящее время известно около ста типов ВПЧ с различным онкогенным потенциалом, которые условно объединяют в группы высокого и низкого онкогенного риска. Более 90% всех цервикальных карцином позитивны к присутствию ВПЧ. Наиболее часто в биоматериале из опухолей шейки матки обнаруживают 16-й и 18-й типы. Выявление ДНК ВПЧ не подтверждает наличие злокачественного процесса, в большинстве (до 90%) случаев в течение 12-36 месяцев происходит элиминация вируса и самоизлечение. При длительной хронической персистенции вируса и в зависимости от его типа повышается риск развития онкологического процесса. Диагностика заболевания требует дополнительного цитологического, гистологического исследования и динамического наблюдения.
Поскольку ВПЧ инфицирует эпителиальные клетки, необходимым условием получения достоверного результата является соблюдение техники взятия соскоба. В состав тестов по диагностике и мониторингу ВПЧ введен специальный параметр – контроль взятия материала (КВМ). КВМ – это тест по определению количества геномной ДНК человека в биоматериале, источником которой служат эпителиальные клетки, попавшие в пробу.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфичные участки ДНК ВПЧ 16, 18 типов;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность определения – 100 копий ДНК ВПЧ 16, 18 типов в образце.
Литература
- Профилактика рака шейки матки: Руководство для врачей. – М.: Изд. «МЕДпресс-информ». 2008:41.
- Заболевания шейки матки и генитальные инфекции. Под ред. проф. В.Н. Прилепской. – М.: Изд. «ГЭОТАР-Медиа». 2016:384.
- Папилломавирусная инфекция. Пособие для врачей. Под ред. проф., д.б.н. В.М. Говоруна. 2009:55.
- Bekkers R., Meijer C., et al. Effects of HPV detection in population-based screening programmers for cervical cancer: a Dutch moment. Gynecologic oncology. 2006;100(3):451-454.
- Khan M. et al. The elevated 10-year risk of cervical precancer and cancer in women with human papillomavirus (HPV) type 16 or 18 and the possible utility of type specific HPV testing in clinical practice. Journal of the National Cancer Institute. 2005; 97:1072-1079.
- Snijders J., Meijer C. The value of viral load in HPV detection in screening. HPV today. 2006;8:8-9.
Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла, не ранее 5 –ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. При наличии патологических изменений, взятие материала проводится в день обращения. Накануне и в день обследования пациентке не рекомендуется выполнять спринцевание влагалища. Не рекомендуется взятие биоматериала во время menses, ранее 24- 48 часов после полового контакта, интравагинального УЗИ и кольпоскопии. Если для исследования берут соскоб из уретры, сбор материала проводят до или не ранее 2 – 3 часов после мочеиспускания.
Для мужчин: За 1–2 суток до взятия мазка (соскоба) необходимо исключить половые контакты. Нельзя мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.
С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться
здесь >>
Проявления трансформирующей дисплазии в различной степени.
Ослабление иммунитета.
Профилактические скрининговые исследования.
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено» для каждого типа ВПЧ (16, 18).
- «обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найдены фрагменты ДНК, специфичные для ВПЧ 16, 18 типа; инфицирование ВПЧ указанного типа.
- «не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для ВПЧ 16, 18 типа или концентрация возбудителей в образце ниже границы чувствительности теста.
Контроль взятия материала:
Тест КВМ выполняется до проведения тестов по выявлению ДНК ВПЧ. В случае, если в пробе значение КВМ неудовлетворительное, т.е. менее 4 lg (10000) копий ДНК человека в пробе, исследование ДНК ВПЧ не проводится и рекомендуется повторное взятие биологического материала.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Артикул:
312С-УРО
Срок исполнения:
до 2 рабочих дней ?
Указанный срок не включает день взятия биоматериала
Цена:
590 руб
Взятие мазка/соскоба:
- + 440 руб
В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (Вирус папилломы человека, Human papillomavirus, HPV) высокого онкогенного риска 2-х типов (16 , 18) в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта» в Москве и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.
Источник