Метод пцр при впч 11 и 6 типов
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
[09-020]
Human Papillomavirus 6/11 (HPV 6/11), ДНК [реал-тайм ПЦР]
430 руб.
Исследование для выявления возбудителя папиллома-вирусной инфекции 6-го и 11-го типа (Human Papillomavirus 6/11), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) папиллома-вируса в образце биоматериала.
Синонимы русские
Папиллома-вирусы человека 6-го и 11-го типа, вирусы папилломы человека 6-го и 11-го типа, ВПЧ 6, 11.
Синонимы английские
Papillomavirus hominis 16,11, DNA.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.
Общая информация об исследовании
Вирусы папилломы человека (ВПЧ) поражают эпителий кожи и слизистых оболочек и могут приводить к раку. Они распространяются главным образом половым и контактно-бытовым путем. Возможна передача ВПЧ от инфицированной матери к плоду. К факторам, провоцирующим развитие ВПЧ-инфекции, относятся: ранее начало половой жизни, большое количество половых партнеров, сниженный иммунитет, применение оральных контрацептивов, инфекции, передаваемые половым путем, авитаминозы, курение, проживание в крупных городах.
Инкубационный период длится от 2 месяцев до 2-10 лет. В 30 % случаев в течение 6-12 месяцев происходит самопроизвольное излечение от вируса.
Разные типы ВПЧ могут по-разному воздействовать на эпителий: ВПЧ низкого онкогенного риска типа 1, 2, 3, 5, 6, 11, 30, 40, 42, 43, 44, 53 и 61 способствуют возникновению доброкачественных образований (папиллом, бородавок, кондилом), ВПЧ высокого онкогенного риска типа 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 способны вызывать дисплазию тяжелой степени и рак.
ВПЧ низкого онкогенного риска 6-го и 11-го типа являются наиболее частой причиной развития генитальных бородавок (около 90 %), или остроконечных кондилом – мягковатых образований на тонком основании с дольчатым строением, напоминающим цветную капусту. У мужчин они обычно возникают на крайней плоти и венечной борозде головки полового члена, у женщин – в преддверии влагалища, на малых и больших половых губах, в области заднего прохода. При снижении клеточного иммунитета (в том числе при беременности) могут наблюдаться гигантские кондиломы Бушке – Левенштейна. Наряду с генитальными кондиломами зачастую бывают папилломы шейки матки: экзофитные папилломы (кондиломы), аналогичные по строению аногенитальным кондиломам, или эндофитные папилломы (плоские кондиломы), локализованные в толще эпителия (выявляются при кольпоскопии) и склонные к метастазам (в течение 3-5 лет у 4-10 % женщин).
Для выявления ВПЧ 6-го и 11-го типа используется метод полимеразной цепной реакции, который позволяет выявить ДНК ВПЧ 6-го или 11-го типа в исследуемом биоматериале. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.
Для чего используется исследование?
- Для выявления папиллома-вирусной инфекции 6-го или 11-го типа.
- Чтобы оценить эффективность вакцинации против ВПЧ.
Когда назначается исследование?
- При остроконечных кондиломах.
- При определении показаний к вакцинации против ВПЧ.
- При скрининге рака шейки матки (наряду с цитологическим исследованием) у женщин старше 30 лет.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата
- Инфицирование папиллома-вирусом 6-го и/или 11-го типа.
Причины отрицательного результата
- Отсутствие папиллома-вирусной инфекции, обусловленной ВПЧ 6-го и/или 11-го типа.
- Низкое содержание ВПЧ 6-го/11-го типа в крови.
Также рекомендуется
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала – окрашивание по Папаниколау (Рар-тест)
- Цитологическое исследование мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]
- Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК количественно, без определения типа [реал-тайм ПЦР]
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог, дерматовенеролог, уролог, инфекционист, проктолог, педиатр, ЛОР.
Литература
- Папиллома-вирусная инфекция урогенитального тракта женщин (эпидемиология, клинико-патогенетические особенности, методы диагностики, лечение, профилактика): информационно-методическое пособие / Е.В. Фоляк, Т.М. Соколова, К.Ю. Макаров, А.В. Якимова, В.Р. Мухамедшина, А.В. Усова. – Новосибирск : Вектор-Бест, 2010. – 88 с.
- Bonnez W., Reichman R.C. Papillomaviruses. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
- Garcea R.L. The papillomaviruses / R.L. Garcea, D. DiMaio. – Springer, 2007. – 419 p.
Источник
К счастью, не все типы вируса папилломы человека вызывают тяжелые осложнения в виде рака. Некоторые из них относительно безопасны для пациентов, но тоже могут привести к неприятным последствиям, хоть и менее тяжким. К таким штаммам относятся 6 и 11 тип. Что их объединяет, можно ли их выявить и быстро ли они лечатся?
Особенности ВПЧ 6 и 11 типа
Считается, что рассматриваемые штаммы — одни из самых безвредных. Да, это действительно так, ведь онкологические заболевания они не вызывают, да и другие осложнения встречаются достаточно редко. Причина тому кроется в том, что для активации ВПЧ 6 и 11 требуется чуть больше провоцирующих факторов, чем в случае с другими разновидностями микроорганизма. Например, ослабленный иммунитет лишь сделает возможным внедрение в клетки возбудителей болезни, но для начала их активной деятельности нужно еще что-то, например постоянное злоупотребление спиртным или затяжной простудный недуг.
При этом 6 и 11 штаммы практически не изменяют структуру ДНК пораженных клеток, их функциональность не меняется, а значит, последствия для организма минимальны. Именно эти качества позволяют объединить две разновидности ВПЧ. Впрочем, различия между ними есть, причем на генетическом уровне. Способы распространения инфекции классические:
- половым путем (основной путь заражения);
- бытовым путем (через чужую одежду, постельное белье и посуду);
- социальным путем (бассейны, солярии и прочие места общего пользования);
- родовым путем (от матери к новорожденному);
- контактным путем, например через поцелуй (встречается крайне редко).
Таким образом, в группе риска находятся те люди, которые любят беспорядочные половые связи и не знают элементарных правил гигиены.
Мнение эксперта
Люванова Арина Викторовна, специализируется на женских венерологических заболеваниях
В особой группе риска находятся врачи. Им часто приходится контактировать с выделениями носителей ВПЧ.
Симптомы
Хоть эти типы вируса относительно безопасны, но симптомы проявляют так же скудно, как и другие штаммы. Причина в том, что селятся микроорганизмы внутри клеток и до поры до времени «бездельничают». Но даже после активации вируса иммунитет относительно здорового человека может легко подавить некоторые проявления болезни. Вот и получается, что признаки болезни отсутствуют даже при ее быстром развитии.
Если речь идет об онкогенных видах вирусов ВПЧ, то при условии отсутствия лечения и должной профилактики развитие раковой опухоли — вопрос времени. К такой разновидности относится и ВПЧ 59. Вы можете узнать о причинах заражения и методах лечения этого типа у женщин.
Самый яркий симптом — кондиломы и папилломы. Внешне они чем-то напоминают петушиные гребни, что нехарактерно для большинства других типов вируса папилломы. Некоторая их часть размещаются в районе половых органов, в том числе и на шейке матки. Интересно то, что эти новообразования могут зудеть, что встречается достаточно редко. Кроме того, пациенты сталкиваются с:
- выделениями из половых органов, иногда с неприятным запахом;
- болью при половом акте;
- ощущением жжения при мочеиспускании (когда моча попадает на папиллому);
- тянущим чувством в нижней части живота.
Интоксикация происходит редко, так что рвота и головокружение практически никогда не проявляются.
У мужчин ВПЧ 6 и 11 изредка сопровождается импотенцией. Бояться не стоит, это не навсегда, неприятный симптом пройдет после лечения.
Диагностика
Диагностировать эту болезнь визуальным путем легче, чем многие другие штаммы вируса папилломы. Помогает в этом характерная форма новообразований. Но так как симптоматика проявляется редко, пациентам приходится проходить через ряд тестов и анализов. Кстати, общий анализ крови бессилен. Дело в том, что главная задача обследования кроется не столько в установлении факта болезни, сколько в определении конкретного штамма возбудителя. Это нужно для формирования правильной терапевтической стратегии.
Итак, основные способы диагностики ВПЧ 6 и 11:
- ПЦР. Годами проверенный метод, который быстро показывает факт заражения и штамм вируса. Но вот концентрацию микроорганизмов он не определяет, так что иногда приходится проводить дополнительные обследования.
- Биологический посев. Тут все идеально — точность практически 100%, информация дается полная. Но стоит подобная методика недешево, да и проводится анализ долго — до 3-4 недель.
- Дайджен-тест. Самый современный способ, который сочетает в себе преимущества всех остальных методик. Заключается в исследовании структуры ДНК микроорганизмов.
Не стоит отказываться и от визуального осмотра у гинеколога. Дело в том, что некоторые симптомы ВПЧ 6 и11 пересекаются с признаками других болезней. Выявленные папилломы отметают некоторых «конкурентов», например хламидиоз и гонорею.
Лечение
Если речь идет о терапии онкогенных типов вируса папилломы, то избежать удаления новообразований не получится — именно из них развивается рак. В нашей же ситуации без этого вполне можно обойтись. Врачи могут порекомендовать сделать операцию в том случае, если папилломы доставляют сильные неудобства из-за своих размеров, а также если безвредный тип ВПЧ сочетается с онкогенным (такое случается, хоть и крайне редко). При этом чаще всего в этих целях используется лазерная терапия. Криотерапия (сверхнизкие температуры) и электрокоагуляция (электрический импульс) больше используются для удаления потенциально опасных новообразований.
Стоит ли травить себя антивирусными препаратами, если ВПЧ 6 и 11 не так опасны? Мнения расходятся, но концентрацию вируса в организме уменьшить необходимо. Для этого используются такие средства, как:
- Изопринозин (стоит около 1000 рублей);
- Циклоферон (стоимость примерно 100 рублей);
- Гроприносин (цена находится в районе 600 рублей);
- Панавир (в зависимости от формы выпуска и дозировки стоимость может колебаться от 200 до 3700 рублей).
В борьбе с ВПЧ 6 и 11 очень важную роль играет иммунитет. Поэтому прием витаминных комплексов и иммуномодуляторов лишним не будет точно.
Последствия и опасность
В глубочайшей теории даже такие безобидные штаммы вируса папилломы, как 6 и 11, все-таки могут вызвать рак. Но воспринимать эту угрозу всерьез не стоит, В крайнем случае врач даст рекомендации для дополнительного снижения риска. Но бесследно ВПЧ все равно не проходит. Пациенты сталкиваются с:
- бесплодием;
- импотенцией;
- нарушением зрения и слуха;
- хроническим расстройством кишечника;
- постоянной усталостью и сонливостью.
Стоит отметить, что в случае с рассматриваемыми штаммами даже эти осложнения проявляются довольно редко.
ВПЧ относится к таким болезням, которые проще предотвратить, чем полностью вылечить, вы можете узнать, посмотрев данный видеоролик, о симптомах ВПЧ, а также узнаете какую профилактику нужно проводить.
Источник