Мазок на впч количественным методом что это
Автор статьи
Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.
Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.
Общие сведения
Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.
Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:
- наличие ВПЧ;
- штаммы, которыми инфицирован больной;
- количественное содержание вируса в организме.
Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.
Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.
Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.
Показания для анализа
Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом. 
ВПЧ распространяется следующими путями:
- при незащищенных половых контактах;
- при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
- контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
- во время тесного контакта с кожей больного.
Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.
Преимущества метода
ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:
- Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
- Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
- Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
- Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.
Недостатки метода
Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.
Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.
Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:
- собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
- нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
- реагенты были непригодными.
Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.
Виды методик
В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.
Качественный способ
Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие.
Генотипирование
Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».
Комбинированный метод
Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.
Количественный метод
Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.
Как сдавать анализ
Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.
Как сдают анализ мужчины
Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения.
Как сдают анализ женщины
Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику.
Забор биоматериала
Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.
Расшифровка анализа ПЦР
В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.
Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:
- Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
- Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
- Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.
В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.
Источник
Определить наличие вируса папилломы человека чаще всего можно, обнаружив у себя кожные образования на теле. Однако не так просто увидеть, например, остроконечные кондиломы, которые располагаются в аногенитальной области и на слизистых половых органов. Поэтому чаще всего наличие подобных образований можно обнаружить только на осмотре у врача. Активное развитие вируса может привести к серьезным последствиям.
Основная опасность вируса – возможность развития злокачественных опухолей. Некоторые виды вируса отличаются большой степенью онкогенности. Поэтому ранняя диагностика проблемы крайне важна. Мазок на ВПЧ – это один из способов определить наличие вируса в организме и степень его опасности, т.е его тип. Процедура простая, безболезненная и не требующая много времени для получения результата.
Любой мазок представляет из себя нанесенный на предметное стеклышко биологический материал. Это может быть кровь, моча, соскоб со слизистых и иные варианты.
Фото 1. Мазок – стандартная процедура при посещении кабинета гинеколога, но к ней надо подготовиться. Источник: Flickr (Georgia Physicians).
Мазок на ВПЧ у женщин и мужчин
Мазок на онкогенные типы ВПЧ проводится благодаря взятию содержимого цервикального канала и соскоба слизистой шейки матки у женщин, и мазок из уретры у мужчин.
Мазок на ВПЧ позволяет определить следующие онкогенные типы вируса: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59.
При этом, существует два варианта исследования мазка:
- Цитологическое исследование. Позволяет определить наличие или отсутствие атипических клеток в собранном материале. Производится в связи с тем, что онкогенные типы ВПЧ способны приводить к развитию эрозий шейки матки и рака;
- Определение наличия папилломавируса. Дает возможность узнать присутствует или нет ВПЧ в организме, но не позволяет получить информацию о его количественном содержании.
Присутствие папилломавируса человека в собранном материале определяется при помощи метода ПЦР (полимеразная цепная реакция). Метод основан на культивировании ВПЧ в лабораторных условиях и увеличении количества его ДНК. Даже если в исследуемый биологический материал попали единичные вирусные частицы, они будут обнаружены с очень большой вероятностью.
Мазок на ВПЧ у женщин производится при наличии, выявлении остроконечных кондилом
или диагностике рака/предраковых состояний шейки матки.
Папилломавирус особенно большую опасность представляет именно для женщин. Диагностирование рака шейки матки и других онкологических заболеваний связано с наличием высокоонкогенных типов вируса в организме женщины.
Мазок из уретры мужчины позволяет определить только наличие ВПЧ, анализ имеет довольно низкую эффективность, потому что способен обнаружить только наличие больших скоплений папилломавируса.
ПЦР же позволяет обнаружить наличие даже единичных частиц вируса, дает возможность определить их тип и онкогенность.
Для диагностики ВПЧ у мужчин часто используется Диджитал тест – наиболее эффективный метод исследования на наличие папилломавируса. Для определения даже незначительный факт присутствия вируса. Для исследования берется соскоб из тканей уретры с помощью цервикальной цитологической щеточки.
Показания к проведению исследования
Абсолютных показаний к взятию мазка на предмет наличия ВПЧ не существует, ввиду его относительно невысокой точности.
Данные цитологического исследования также могут оказаться не столь точны, как результаты биопсии. Это связано с тем, что при проведении цитологии изучается только верхний слой клеток слизистой оболочки, тогда как биопсия позволяет оценить состояние слизистой на всей ее толщине.
Забор мазка на анализ ВПЧ назначается при следующих показаниях:
- Выявление эрозий шейки матки;
- Диагностика рака или предрака шейки матки;
- Наличие остроконечных кондилом в аногенитальной области;
- Выявление онкогенного типа ВПЧ у полового партнера.
Обратите внимание! Вместо мазка на ВПЧ и цитологии предпочтительнее проводить иммуноферментный анализ на наличие вирусов и/или биопсию.
Подготовка к процедуре
Как и любая иная медицинская манипуляция, сдача мазка требует определенной подготовки со стороны пациента.
Перед проведением анализа необходимо выполнить следующие процедуры:
- За 2 – 3 дня до сдачи следует исключить половые контакты в любой форме;
- Интимную зону следует тщательно выбрить, избегая, по возможности, порезов;
- В день взятия мазка принять душ, тщательно вымыть половые органы.
После проведения процедуры на протяжении недели следует соблюдать все правила личной гигиены. От интимной близости стоит воздержаться до момента получения результатов, чтобы предотвратить возможное заражение партнера.
Как берут мазок на ВПЧ
Взятие цервикального мазка ответственная процедура, которая должна проводиться в условиях лечебного учреждения. Несоблюдение стерильности может привести к занесению инфекции во внутренние женские половые органы, что приведет к развитию эндометрита.
Процедуру выполняет медицинская сестра или врач-гинеколог.
Женщину просят лечь на гинекологическое кресло, после чего выполняется ряд действий:
- Первой щеточкой берется мазок с уретры и наносится на предметное стекло;
- Во влагалище вводится гинекологическое зеркало, после чего новой щеточкой цервикальный канал очищается от слизи. Следующая, уже третья стерильная щеточка, вводится непосредственно в цервикальный канал, поворачивается на 360 градусов, после чего материал наносится на предметное стекло.
- Последний мазок берется с заднего свода влагалища.
Взятие трех мазков необходимо для достоверного определения наличия или отсутствия патогенного вируса. В случае присутствия у женщины выраженных клинических проявлений папилломавируса, возможно взятие только одного мазка.
Как долго ждать результатов
Скорость проверки результатов зависит от используемого оборудования и нагрузки на конкретно взятую лабораторию. Закономерно, что, чем новее и качественнее аппаратура, тем дороже будет стоить проведение анализа.
В большинстве случаев анализ мазка на ВПЧ проводится на протяжении 2 – 5 дней. Столь длительные сроки связаны с необходимостью культивирования вирусов методом ПЦР, что является довольно трудоемкой процедурой.
Цитологическое исследование может быть выполнено за 1 – 2 дня.
Фото 2. Анализ мазка на ВПЧ – длительная процедура. Между первым и вторым визитом к врачу может пройти неделя. Источник: Flickr (Conference of Boston Teaching Hospitals).
Расшифровка результатов анализа
Результаты цитологического исследования могут быть двух вариантов:
- Атипичный клеток не обнаружено. Свидетельствует об отсутствии онкологического процесса у женщины.
- Атипичные клетки найдены. Указывается характеристика атипичных клеток, их количество. Свидетельствует о выявлении рака или предрака и требует дальнейшего, более подробного обследования.
В результатах анализов может просто указываться пометка «обнаружен/не обнаружен» относительно каждого типа, либо, при использовании более современных технологий, определяться количество выявленных копий вирусного генома.
- <1000 геном-эквивалентов свидетельствует о незначительном содержании ВПЧ в организме;
- От 1000 до 100000 геном-эквивалентов указывает значительно содержание папилломавируса;
- >10000 геном-эквивалентов является индикатором высокой вирусной нагрузки.
Источник
Количественный анализ на ВПЧ (вирус папилломы человека, папилломавирус) позволяет выявить концентрацию этого возбудителя. Папилломавирусная инфекция вызывает рак и предрак шейки матки, мочевого пузыря, наружных половых органов у мужчин и женщин. Инфицирование приводит к появлению предраковых состояний – дисплазий, генитальных бородавок – кондилом, висячих родинок – папиллом и других поражений кожи и слизистых.
Зачем проводится количественный анализ на ВПЧ
Папилломавирусы воздействуют на клетки, провоцируя онкологию. В этом и кроется их основная опасность.
Всего обнаружено более 170 видов (штаммов) возбудителя, каждый из которых имеет свой номер. Микроорганизмы обладают различной способностью вызывать рак (онкогенностью), которая может быть высокой, средней и низкой. Есть не до конца изученные разновидности, опасность которых пока не ясна. Их со временем отнесут к одной из категорий.
Существует классификация вирусных типов, которая постоянно обновляется и уточняется по мере изучения возбудителей и открытия новых штаммов.
Самыми онкогенными считаются штаммы 16 и 18, на которые приходится до 90% раковых опухолей. Но типы, не относящиеся к высокоонкогенным, тоже могут стать причиной онкологии, правда, в более редких случаях. Эти микроорганизмы вызывают бородавки, папилломы, кожные заболевания, поэтому считать их безобидными не стоит.
Схематическое изображение генома ВПЧ тип 16
Классификация ВПЧ по типу онкогенности, согласно исследованиям 1991-1992, 2002, 2003, 2006 г.
| Степень онкогенности | Штаммы |
| Практически не вызывающие рак | 1-5, 10, 28, 49 |
| Низкоонкогенные- редко вызывающие рак | 6, 11, 13, 32,34, 40, 42- 44, 51, 54, 72 |
| Средней степени онкогенности | 26, 30, 35, 45, 52, 53, 56, 58,65 |
| Высокоонкогенные – чаще всего вызывающие рак | 16, 18, 31, 33, 39, 50, 59, 64, 68, 70 |
Все эти возбудители опасны только в больших в концентрациях – в остальных случаях они не оказывают значительного воздействия на клетки и не вызывают онкологию. Поэтому важно определить не только наличие инфицирования, но и уровень заражения. Для этого проводится количественный анализ на ВПЧ. Он, как и качественное исследование, показывает тип возбудителя, а соответственно, и риск развития рака.
Показания для выполнения количественного анализа на ВПЧ
- Скрининг шейки матки – исследование, которое периодически рекомендуется проходить всем женщинам для выявления раковых и предраковых патологий. Помимо анализа на ВПЧ, в него входят кольпоскопия – осмотр шейки матки при помощи прибора-кольпоскопа, и взятие мазка по Папаниколау на злокачественные и предраковые клетки.
- Патологические изменения на поверхности шейки матки, которые, возможно, вызваны папилломавирусом.
- Плохие результаты мазков с шейки матки по Папаниколау. При наличии вирусного заражения в них обнаруживаются изменённые (атипичные клетки), имеющие неправильную форму, строение и размер. Связать клеточные изменения с папилломавирусной инфекцией можно с помощью лабораторной диагностики.
- Предраковые поражения мочевого пузыря.
- Кожные проявления в аногенитальной области, подозрительные на заражение папилломавирусной инфекцией.
- Мониторинг лечения. Исследование проводится, чтобы оценить эффективность применяемых лечебных методов, направленных на устранение этого возбудителя.
Для исследования берутся мазки (соскобы) с различных областей урогенитального тракта. Диагностика безболезненна, безвредна, безопасна и не вызывает осложнений.
Протокол исследования на папилломавирус
Подготовка к взятию материала для количественного анализа на ВПЧ
- В течение суток перед посещением клиники нужно отказаться от введения в половые пути любых препаратов и проведения спринцеваний.
- В течение двух суток до сдачи материала нельзя жить половой жизнью.
- Если в день взятия соскобов нужно пройти трансвагинальное УЗИ малого таза с ведением датчика во влагалище, сначала берется материал для исследования, а потом проводится ультразвуковая диагностика.
- Женщин не обследуют во время менструации, после родов и абортов. В образцы попадет кровь, и результат исследования исказиться.
- Перед посещением врача нежелательно мыть половые органы средствами, содержащими антисептические препараты.
- Перед взятием мазка из уретры нельзя мочиться, чтобы урина не смыла микроорганизмы.
Как берётся материал для качественного анализа на ВПЧ
Для исследования берутся соскобы:
- со слизистой шейки матки;
- из цервикального канала, соединяющего шейку матки и влагалище;
- из заднего свода влагалища, находящегося под шейкой;
- из уретры – мочеиспускательного канала. Такие соскобы берут у мужчин и женщин.
В Университетской клинике используется передовой жидкостной метод количественной оценки ВПЧ, при котором полученные образцы транспортируются в специальной жидкости. Жидкостная методика позволяет избежать пересушивания соскобов и дает возможность исследовать максимальное количество материала.
У женщин для взятия материала во влагалище вводится медицинское зеркало, позволяющее получить доступ к шейке матки. Проводится осмотр эпителия, покрывающего шейку, а затем с помощью тампона врач убирает слизь и выделения, которые могут загрязнить образец.
После этого берется материал для исследования:
- С поверхности шейки матки (зктоцервикса). Соскоб берут при помощи цервикальной щётки (цитощетки), представляющей собой пластиковое устройство с жесткими щетинками. После взятия материала ее съемная головка отделяется и помещается в пробирку с раствором для транспортировки. Образец маркируется буквой “С”.
- Из цервикального канала. Образец также берется с помощью цитощетки. Обязательно исследуется зона трансформации, находящаяся возле выхода из цервикального канала. Так называется место соединения эпителия, покрывающего шейку матки снаружи и находящегося внутри шейки. Именно здесь чаще всего образуются раковые опухоли, вызванные воздействием папилломавируса. Образец маркируется буквой “Е”.
- Из нижнего свода влагалища. Биоматериал берётся с помощью мягкого зонда-тампона или комбинированного зонда. С помощью вращательных движений врач забирает достаточное количество слизи, затем рабочую часть устройства отделяют и помещают в раствор для транспортировки. Образец маркируется буквой “V”.
- Материал из уретры. Берётся с помощью тонкого зонда. Образец маркируется буквой “U. У мужчин такой соскоб берут на кушетке, а у женщин – на гинекологическом кресле.
Врач может назначить не все варианты исследований. Всё зависит от области поражения, симптомов болезни и пола пациента. У женщин чаще всего берутся образцы с шейки матки из цервикального канала, а у мужчин – из уретры.
Полученные образцы отправляют в лабораторию. Каждая взятая порция материала исследуется отдельно.
Как проводится анализ на ВПЧ (количественный)
Образцы, переданные в лабораторию, промывают, чтобы очистить от примесей. Затем проводится реакция амплификации (усиления, увеличения). При ее проведении частички генетического материала – ДНК ВПЧ многократно копируются (реплицируются), соединяясь с реактивами. Такая методика проведения анализа называется ПЦР – полимеразной цепной реакцией.
ПЦР диагностика
Полученные соединения обладают эффектом свечения – флуоресценции, который регистрируется специальным прибором. Количественное исследование основано на зависимости вирусной концентрации от интенсивности флюоресценции. Чем раньше и интенсивнее начнёт светиться образец, тем выше содержание возбудителя.
Все применяемые реактивы, реагируют на определенные типы вируса, поэтому выявляют только определенные штаммы, например, ВПЧ 16 и 18. Существует несколько вариантов такого анализа, обнаруживающих различные разновидности папилломавируса. Выявление типа микроорганизма, проводимое при количественном исследовании, называется типированием.
Полученные результаты обрабатываются с помощью компьютера. Программа определяет абсолютные и относительные показатели содержания возбудителей.
В большинстве лабораторий минимальный уровень заражения не берется во внимание. Если микроорганизмов меньше 100000 генокопий/мл или 1 пг/мл, результат считается отрицательным. Столь малое количество папилломавирусов не может вызвать рак и другие заболевания.
Поделиться ссылкой:
Источник