Мазок на впч количественный

Последнее изменение: ноябрь 2020

Вирус папилломы человека (ВПЧ) – ДНК-содержащий вирус семейства Papillomaviridae. В это семейство входят распространенные и генетически разнообразные эпителиотропные вирусы, инфицирующие и поражающие клетки эпителия (кожа, слизистые аногенитальной, ротовой полости).

В настоящее время идентифицировано более 130 генотипов ВПЧ. По клинической классификации их делят на кожные и аногенитальные типы папилломавирусов. Именно аногенитальные типы ВПЧ вызывают поражения слизистых оболочек влагалища и шейки матки. Самые безобидные из этих заболеваний – доброкачественные остроконечные кондиломы половых органов, самые опасные – рак шейки матки.

Передаются вирусы папилломы человека при половых контактах. С началом половой жизни вирусом папилломы человека заражается подавляющее большинство женщин. Следует учитывать, что риск заражения ВПЧ зависит и от количества половых партнёров и от сексуального поведения единственного партнёра (распространенность ВПЧ у мужчин примерно равна распространенности среди женщин).

Сама по себе папилломавирусная инфекция – не заболевание. Через 6-18 месяцев у ~80% инфицированных женщин вирус уходит из организма самостоятельно, без какого-либо лечения, не вызывая болезней (так называемая спонтанная элиминация). И только у нескольких процентов женщин с хронической (персистентной) инфекцией, обусловленной высокоонкогенными генотипами ВПЧ, через 10-20 лет может развиться рак шейки матки. Как кажется, времени для успешной диагностики и лечения вполне достаточно. Но расслабляться не стоит.

Папилломавирусная инфекция очень коварна, и связанные с нею предраковые изменения, как правило, не только не вызывают никакого беспокойства и дискомфорта, но часто и не обнаруживаются при обычном гинекологическом осмотре.

Поэтому для выявления папилломавирусной инфекции применяются анализы на вирус папилломы человека – ВПЧ-тест методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). ВПЧ-тест – надежный «помощник» врача: обнаружение папилломавирусов группы «высокого канцерогенного риска» в анализе на ВПЧ обращает особое внимание на вероятность развития онкологической патологии шейки матки.

При этом нужно учитывать, что выявление ВПЧ-инфекции при анализах на ВПЧ у женщин еще не является основанием для постановки диагноза злокачественной опухоли, но служит поводом к дальнейшему обследованию, более интенсивному наблюдению и, при необходимости, лечению предраковых изменений слизистой шейки матки.

Исход ВПЧ-инфекции зависит от генотипа вируса. Все папилломавирусы подразделяются на группы по «вредности» или «онкогенности». ВПЧ-тесты – анализы на вирус папилломы человека методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяют выявить все распространённые и клинически значимые генотипы ВПЧ.

К группе «низкого канцерогенного риска» относятся 6, 11 генотипы ВПЧ: они могут быть причиной остроконечных кондилом и дисплазий легкой степени. Анализ на ВПЧ 6 и 11 генотипов применяется для дифференциальной диагностики с заболеваниями непапилломавирусной этиологии и при обследовании беременных для оценки риска развития папилломатоза гортани у новорожденных.

Вирус папилломы человека 6/11, качественное определение ДНК, ПЦР

К раку шейки матки чаще всех могут приводить 16 и 18 генотипы папилломавирусов. Они, вместе с 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68 типами входят в группу «высокого канцерогенного риска». При проведении анализов на вирус папилломы человека именно на эти генотипы нужно обращать особое внимание (наиболее важен анализ ДНК ВПЧ 16 типа и 18 типа). Особенно, если их концентрация («вирусная нагрузка») высока. А онкогенный потенциал 51 и 56 типов не так велик, поэтому они наименее опасны, даже если в анализе на ВПЧ присутствуют в относительно большом количестве.

• Вирус папилломы человека 16/18, качественное определение ДНК, ПЦР
• Вирус папилломы человека 16/18, количественное определение ДНК, ПЦР
• Вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68), суммарное качественное определение ДНК, ПЦР
• Вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52,56, 58, 59), качественное определение ДНК с указанием типа вируса
• Вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68), суммарное количественное определение ДНК
• ВПЧ-тест расширенный (с определением количества и типа вируса)

Сдать анализ на ВПЧ у женщин методом ПЦР (ВПЧ-тест) можно самостоятельно, без направления врача. Если ВПЧ-инфекция не выявлена (отрицательный результат ВПЧ-теста), то риск развития рака шейки матки низок. Но следует помнить – при продолжении активной половой жизни риск инфицирования ВПЧ сохраняется.

При положительном результате анализа на ВПЧ (ВПЧ-теста) – обнаружении ВПЧ высокого канцерогенного риска, необходимо сделать расширенное исследование для уточнения генотипа вируса (анализ ВПЧ – типирование) и «вирусной нагрузки» (вирус папилломы человека -количественный анализ). Затем необходимо обратиться к врачу-гинекологу для проведения кольпоскопии – детального осмотра шейки матки под увеличением с помощью специального прибора – кольпоскопа.

Конечно, все дополнительные анализы на вирус папилломы человека и другие исследования должны проводиться по назначению и под контролем врача.

Если поражение слизистой шейки матки выявлено на ранней стадии, предшествующей раку, то лечение более эффективно и практически не имеет побочных эффектов. Если не обнаружено никаких патологических изменений слизистой шейки матки, то и необходимости в лечении нет: вероятнее всего, организм справится с вирусом самостоятельно.

Однако через 1 год необходимо пройти повторное ВПЧ-тестирование и, если вирус все еще присутствует в анализе на ВПЧ, снова обследоваться у врача-гинеколога.

Анализ на вирус папилломы человека (ВПЧ) методом ПЦР и цитологические исследования.

В России в систему обязательного медицинского страхования (ОМС) включено цитологическое исследование («мазок на онкоцитологию»). Нужны ли тогда анализы на вирус папилломы человека – ВПЧ-тесты?

Основой современных скрининговых программ раннего выявления онкологической патологии шейки матки является цитологическое исследование по Папаниколау (ПАП-тест, окраска по Папаниколау). К сожалению, далеко не во всех российских медицинских учреждениях используется эта методика, очень часто применяются другие, менее совершенные, способы приготовления (окраски) цитологического мазка.

Кроме того важно знать, что цитологический метод – это не анализы на вирус папилломы человека. Цитология «не видит» сам вирус, а выявляет клетки эпителия, уже измененные под его воздействием (то есть клиническую и субклиническую формы ВПЧ-инфекции). У цитологического теста есть и весьма существенные недостатки – низкая чувствительность, субъективность трактовки и зависимость результата от качества взятия цитологического мазка.

Именно поэтому для традиционного цитологического скрининга характерно большое количество ложноотрицательных и неопределенных результатов, требующих повторных исследований.

Для уменьшения возможности ошибок цитологические тесты были усовершенствованы – внедрён метод жидкостной цитологии. Жидкостная цитология – новая технология приготовления образцов клеток из шейки матки для цитологического исследования. Преимущества данного метода – уменьшение количества неадекватных мазков, артефактов, возможность избежать загрязнения проб воспалительным экссудатом, эритроцитами, что обеспечивает высокое качество цитологических препаратов. Сегодня именно этот метод цитологического скрининга заболеваний шейки матки рекомендован ВОЗ (Всемирной Организацией Здравоохранения) в качестве «золотого стандарта» для исследований цервикальных мазков.

ПАП-тест жидкостный

Согласно последним международным и отечественным рекомендациям совместное применение анализа на ВПЧ (ВПЧ-теста методом ПЦР) и цитологического исследования (ПАП-теста) является предпочтительным методом для раннего выявления онкологической патологии шейки матки у женщин старше 29 лет. Такой скрининг необходимо проходить регулярно – один раз в 3 года.

ВПЧ-ПАП-тест (комплекс тестов: ВПЧ расширенный с определением количества и типа вируса + ПАП-тест)

ВПЧ-ПАП-тест жидкостный (комплекс тестов: ВПЧ расширенный с определением количества и типа вируса + ПАП-тест)

Количественный анализ на ВПЧ (вирус папилломы человека, папилломавирус) позволяет выявить концентрацию этого возбудителя. Папилломавирусная инфекция вызывает рак и предрак шейки матки, мочевого пузыря, наружных половых органов у мужчин и женщин. Инфицирование приводит к появлению предраковых состояний – дисплазий, генитальных бородавок – кондилом, висячих родинок – папиллом и других поражений кожи и слизистых.

Зачем проводится количественный анализ на ВПЧ

Папилломавирусы воздействуют на клетки, провоцируя онкологию. В этом и кроется их основная опасность.

Всего обнаружено более 170 видов (штаммов) возбудителя, каждый из которых имеет свой номер. Микроорганизмы обладают различной способностью вызывать рак (онкогенностью), которая может быть высокой, средней и низкой. Есть не до конца изученные разновидности, опасность которых пока не ясна. Их со временем отнесут к одной из категорий.

Существует классификация вирусных типов, которая постоянно обновляется и уточняется по мере изучения возбудителей и открытия новых штаммов.

Самыми онкогенными считаются штаммы 16 и 18, на которые приходится до 90% раковых опухолей. Но типы, не относящиеся к высокоонкогенным, тоже могут стать причиной онкологии, правда, в более редких случаях. Эти микроорганизмы вызывают бородавки, папилломы, кожные заболевания, поэтому считать их безобидными не стоит.

Схематическое изображение генома ВПЧ тип 16

 Классификация ВПЧ по типу онкогенности, согласно исследованиям 1991-1992, 2002, 2003, 2006 г.

Все эти возбудители опасны только в больших в концентрациях – в остальных случаях они не оказывают значительного воздействия на клетки и не вызывают онкологию. Поэтому важно определить не только наличие инфицирования, но и уровень заражения. Для этого проводится количественный анализ на ВПЧ. Он, как и качественное исследование, показывает тип возбудителя, а соответственно, и риск развития рака.

Показания для выполнения количественного анализа на ВПЧ

• Скрининг шейки матки – исследование, которое периодически рекомендуется проходить всем женщинам для выявления раковых и предраковых патологий. Помимо анализа на ВПЧ, в него входят кольпоскопия – осмотр шейки матки при помощи прибора-кольпоскопа, и взятие мазка по Папаниколау на злокачественные и предраковые клетки.
• Патологические изменения на поверхности шейки матки, которые, возможно, вызваны папилломавирусом.
• Плохие результаты мазков с шейки матки по Папаниколау. При наличии вирусного заражения в них обнаруживаются изменённые (атипичные клетки), имеющие неправильную форму, строение и размер. Связать клеточные изменения с папилломавирусной инфекцией можно с помощью лабораторной диагностики.
• Предраковые поражения мочевого пузыря.
• Кожные проявления в аногенитальной области, подозрительные на заражение папилломавирусной инфекцией.
• Мониторинг лечения. Исследование проводится, чтобы оценить эффективность применяемых лечебных методов, направленных на устранение этого возбудителя.

Для исследования берутся мазки (соскобы) с различных областей урогенитального тракта. Диагностика безболезненна, безвредна, безопасна и не вызывает осложнений.

Протокол исследования на папилломавирус

Подготовка к взятию материала для количественного анализа на ВПЧ

• В течение суток перед посещением клиники нужно отказаться от введения в половые пути любых препаратов и проведения спринцеваний.
• В течение двух суток до сдачи материала нельзя жить половой жизнью.
• Если в день взятия соскобов нужно пройти трансвагинальное УЗИ малого таза с ведением датчика во влагалище, сначала берется материал для исследования, а потом проводится ультразвуковая диагностика.
• Женщин не обследуют во время менструации, после родов и абортов. В образцы попадет кровь, и результат исследования исказиться.
• Перед посещением врача нежелательно мыть половые органы средствами, содержащими антисептические препараты.
• Перед взятием мазка из уретры нельзя мочиться, чтобы урина не смыла микроорганизмы.

Как берётся материал для качественного анализа на ВПЧ

Для исследования берутся соскобы:

• со слизистой шейки матки;
• из цервикального канала, соединяющего шейку матки и влагалище;
• из заднего свода влагалища, находящегося под шейкой;
• из уретры – мочеиспускательного канала. Такие соскобы берут у мужчин и женщин.

В Университетской клинике используется передовой жидкостной метод количественной оценки ВПЧ, при котором полученные образцы транспортируются в специальной жидкости. Жидкостная методика позволяет избежать пересушивания соскобов и дает возможность исследовать максимальное количество материала.

У женщин для взятия материала во влагалище вводится медицинское зеркало, позволяющее получить доступ к шейке матки. Проводится осмотр эпителия, покрывающего шейку, а затем с помощью тампона врач убирает слизь и выделения, которые могут загрязнить образец.

После этого берется материал для исследования:

• С поверхности шейки матки (зктоцервикса). Соскоб берут при помощи цервикальной щётки (цитощетки), представляющей собой пластиковое устройство с жесткими щетинками. После взятия материала ее съемная головка отделяется и помещается в пробирку с раствором для транспортировки. Образец маркируется буквой “С”.
• Из цервикального канала. Образец также берется с помощью цитощетки. Обязательно исследуется зона трансформации, находящаяся возле выхода из цервикального канала. Так называется место соединения эпителия, покрывающего шейку матки снаружи и находящегося внутри шейки. Именно здесь чаще всего образуются раковые опухоли, вызванные воздействием папилломавируса. Образец маркируется буквой “Е”.
• Из нижнего свода влагалища. Биоматериал берётся с помощью мягкого зонда-тампона или комбинированного зонда. С помощью вращательных движений врач забирает достаточное количество слизи, затем рабочую часть устройства отделяют и помещают в раствор для транспортировки. Образец маркируется буквой “V”.
• Материал из уретры. Берётся с помощью тонкого зонда. Образец маркируется буквой “U. У мужчин такой соскоб берут на кушетке, а у женщин – на гинекологическом кресле.

Врач может назначить не все варианты исследований. Всё зависит от области поражения, симптомов болезни и пола пациента. У женщин чаще всего берутся образцы с шейки матки из цервикального канала, а у мужчин – из уретры.

Полученные образцы отправляют в лабораторию. Каждая взятая порция материала исследуется отдельно.

Как проводится анализ на ВПЧ (количественный)

Образцы, переданные в лабораторию, промывают, чтобы очистить от примесей. Затем проводится реакция амплификации (усиления, увеличения). При ее проведении частички генетического материала – ДНК ВПЧ многократно копируются (реплицируются), соединяясь с реактивами. Такая методика проведения анализа называется ПЦР – полимеразной цепной реакцией.

ПЦР диагностика

Полученные соединения обладают эффектом свечения – флуоресценции, который регистрируется специальным прибором. Количественное исследование основано на зависимости вирусной концентрации от интенсивности флюоресценции. Чем раньше и интенсивнее начнёт светиться образец, тем выше содержание возбудителя.

Все применяемые реактивы, реагируют на определенные типы вируса, поэтому выявляют только определенные штаммы, например, ВПЧ 16 и 18. Существует несколько вариантов такого анализа, обнаруживающих различные разновидности папилломавируса. Выявление типа микроорганизма, проводимое при количественном исследовании, называется типированием.

Полученные результаты обрабатываются с помощью компьютера. Программа определяет абсолютные и относительные показатели содержания возбудителей.

В большинстве лабораторий минимальный уровень заражения не берется во внимание. Если микроорганизмов меньше 100000 генокопий/мл или 1 пг/мл, результат считается отрицательным. Столь малое количество папилломавирусов не может вызвать рак и другие заболевания.

Поделиться ссылкой: