Как делают днк впч
Тест ДНК ВПЧ – это метод, который позволяет точно определить наличие вируса HPV (папилломы человека). HPV отвечает за развитие раковых заболеваний, в частности, шейки матки. В отличие от традиционной цитологии, исследование позволит обнаружить ВПЧ на самом раннем этапе развития инфекции, а также в ситуации, когда протекает она бессимптомно.
Если результат теста на ДНК ВПЧ положительный, это не эквивалентно онкологическому заболеванию, однако, является показанием для проведения регулярной диагностики.
Что такое HPV?
HPV (папилломавирус) широко присутствует в мировой популяции, особенно среди молодых людей. По оценкам Всемирной Организации Здравоохранения, около 80% людей в возрастной категории 19-45 лет имели контакт с этой инфекцией. Наиболее серьезным последствием заражения папилломавирусом является рак.
Почти в 100 процентах случаев причиной злокачественного поражения шейки матки является предшествующее инфицирование вирусом HPV. Несмотря на то что о вирусе папилломы говорят чаще всего в контексте рака у женщин, мужчины также находятся в опасности. Они не являются только носителями вируса – в основе 90 процентов диагнозов рака прямой кишки и 40 процентов рака полового члена лежит присутствие инфицирования вирусом HPV.
Как можно заразиться HPV?
Этот вирус передается путем половых контактов или использования общих предметов личной гигиены. Возможна также передача вируса от матери к ребенку во время родов. Из 200 серотипов ВПЧ, эти характеризуются как неонкогенные (6, 11, 13, 30, 40, 42, 43 и 44), вызывают возникновение кондилом.
Эти поражения кожи, локализованные на коже половых губ и шейке матки (для женщин) или на пенисе, мошонке и прямой кишке у мужчин, принимают характер отдельных или сливающихся форм, очень напоминающих цветную капусту.
Некоторые остроконечные кондиломы уничтожаются самопроизвольно (под воздействие защитных сил организма), остальные необходимо как можно скорее удалить, так как они являются источником заражения последующих сексуальных партнеров.
ВПЧ и рак – кто подвержен раку?
Гораздо более опасные последствия несет в себе инфекция типами канцерогенных вирусов – 16, 18, 31, 33 и 45. Сам факт заражения не однозначен, но доказано, что HPV повышает риск его возникновения. Решающее значение для начала процесса развития неоваскуляризации имеет наличие так называемых кофакторов, то есть факторов, сопровождающих.
Основные из них это:
- курение табака;
- ранний период сексуальной инициации;
- частая смена партнеров;
- не использование презервативов;
- ослабление иммунитета;
- пероральная гормональная контрацепция;
- сосуществование заболеваний: ВИЧ-инфекции, Хламидий (Chlamydia trachomatis) и герпеса.
Тест на ДНК вируса HPV – показания
Ежегодно раком шейки матки заболевает более 500 тысяч женщин. К сожалению, многие из них умирают. Наличие HPV обнаруживается в 100% случаев инвазивного рака шейки матки, в 75% предракового состояния и в 15 % точных результатов цитологического исследования. Молекулярная диагностика инфекции может быть очень эффективным инструментом диагностики раковых заболеваний в первом триместре беременности.
В настоящий момент профилактическая программа основана на скрининге с цитологией. Это предоставляет возможность обнаружить только дополнительные изменения, которые развиваются через несколько десятков лет после заражения.
Когда сделать тест на HPV?
Показания для исследования ДНК HPV следующие:
- рецидивирующие инфекции половых путей (уретры, головки полового члена или крайней плоти);
- рецидивирующие генитальные бородавки;
- планируется беременность;
- наличие эрозий и генитальных бородавок у родственников;
- использование пероральной гормональной контрацепции в течение нескольких лет;
- неоднозначный результат теста Папаниколау.
Тест ДНК HPV должен выполнять ежегодно каждый человек, который активен в сексуальном плане. Стоит помнить, что выполнение теста имеет смысл у лиц после 30 лет. У молодых людей инфекции ВПЧ обычно имеют преходящий характер. Инфекция исчезает самопроизвольно, не приводя к серьезным последствиям для здоровья, поэтому исследование не обязательно, но может быть рекомендовано в отдельных случаях.
Как проводится тестирование на ДНК HPV?
У многих пациенток есть сомнения в том, как правильно сделать тест на ВПЧ. Первым этапом испытаний является получение подходящего материала для исследований. Как подготовиться к исследованию ДНК вируса HPV?
Пациентка не должна идти на диагностику во время менструации, оптимальное время – это, по крайней мере, два дня после прекращения кровотечения. Не допускается ирригация или применение любых вагинальных препаратов за двое суток перед проведением исследования, а в течение 24 ч до него необходимо воздержаться от половых отношений.
Получение материала для анализа, заключается в выполнении мазка с шейки матки при помощи цитощетки которую врач вводит в устье канала шейки матки и пять раз поворачивает вокруг своей оси.
У мужчин материал получают при помощи соскоба из уретры. Процедура взятия биоматериала на анализ ДНК HPV не болезненна.
Суть теста на ДНК – применение метода полимеразной цепной реакции ПЦР (PCR), которая заключается в транслировании большого количества копий ДНК, что позволяет обнаруживать даже незначительные количества фрагментов нуклеиновой кислоты.
Для тестирования на ДНК ВПЧ возможна идентификация нескольких десятков типов вирусов. Анализ ДНК HPV позволяет обнаружить больше четырнадцати генотипов высокого риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 58, 59, 66, 68. Важное значение имеет выявление ВПЧ типов 16 и 18, как высокоонкогенных.
Как интерпретировать результат теста ДНК HPV – расшифровка анализа
Время ожидания результата исследования ДНК ВПЧ составляет 7-10 рабочих дней. Получение положительного результата теста на ДНК ВПЧ подтверждает на 100% присутствие нуклеиновой кислоты вируса папилломы в анализируемом материале. Нужно сказать, что, это не означает неизбежного развития рака шейки матки, а только указывает на принадлежность к группе высокого риска, что не менее важно для предупреждения развития онкологии.
Подтверждение типа ВПЧ 16 и 18 требует обязательного проведения кольпоскопии, независимо от результата мазка папаниколау.
Если результат теста указывает на наличие других онкогенных типов, в обязательном порядке необходимо проведение цитологического исследования.
Повторный тест ДНК HPV проводится через год. Отрицательный результат анализа ДНК вируса HPV указывает на незначительный риск развития злокачественного поражения шейки матки, по крайней мере, в ближайшие несколько лет.
Поделиться ссылкой:
Источник
Существуют десятки видов вируса папилломы человека (ВПЧ). Часть из них не наносит никакого особенного вреда. Другие вызывают появление бородавок и папиллом на коже и слизистых. А самые опасные могут спровоцировать развитие онкологического заболевания, особенно у женщин. Именно поэтому ранняя и точная диагностика ВПЧ может спасти жизнь.
Что такое вирус папилломы человека (ВПЧ) и чем он опасен
Вирус папилломы человека распространен очень широко, им инфицировано 80% всей популяции планеты. Этот вирус передается от человека к человеку — при половом контакте, бытовым путем или во время родов от матери к ребенку. Попадая в организм, этот вирус встраивается в ДНК клетки, заставляя ее делиться не так, как это предусмотрено нашей «программой», а так, как нужно вирусу. Результатом становятся плоские и обычные бородавки и кондиломы. При заражении определенными типами вируса они могут перерождаться в раковые опухоли.
Важно
Самыми онкогенными считаются вирусы папилломы человека 16 и 18 типов. Вирус 16 типа находят в половине случаев рака шейки матки, вирус 18 типа — в 10% случаев.
Вирус может присутствовать в организме, но при этом никак не проявлять себя. Наша иммунная система способна долго сдерживать его. Но достаточно какого-либо сбоя в работе организма — тяжелого инфекционного заболевания, продолжительного стресса, воздействия алкоголя, никотина или наркотиков, — чтобы вирус активировался и прорвал защитный заслон.
Когда назначается анализ на ВПЧ
Если врач обнаружит на вашем теле признаки деятельности вируса, он направит вас на обследование. Мало знать, что вирус как таковой присутствует в организме — гораздо важнее выяснить его тип, поскольку, как уже было сказано, ВПЧ может быть как относительно безвредным, так и смертельно опасным.
Анализ на вирус папилломы человека необходимо сделать и в том случае, если вы планируете беременность, а также при выявлении причин бесплодия, выкидышей и патологий вынашивания. Причем обследование должны пройти оба партнера — ВПЧ передается при незащищенных половых контактах очень легко, и если один из партнеров инфицирован, то и второй, наверняка, тоже.
Какой анализ на вирус папилломы человека может быть назначен: методы исследования
Существует несколько методов лабораторной и инструментальной диагностики вируса папилломы человека. Они преследуют несколько целей: во-первых, выявить сам факт наличия вируса, во-вторых, узнать его разновидность, и в третьих — оценить нанесенный им ущерб, а также выяснить, не начался ли уже процесс перерождения безобидной кондиломы в злокачественную опухоль.
Кольпоскопическое исследование
назначается женщинам для обнаружения кондилом, расположенных в области шейки матки. Исследование достаточно простое — при помощи специального микроскопа врач осматривает слизистые оболочки шейки матки и влагалища. Многократное (8–16-кратное) увеличение позволяет увидеть даже очень маленькие кондиломы. Результат обычно выдается на руки сразу после обследования.
Цитологическое исследование
. Материалом для этого лабораторного исследования является мазок, который содержит клетки эпителия. Образцы клеток рассматриваются под микроскопом. Такое исследование позволяет заметить видоизмененные клетки, указывающие на вирусную инфекцию. Метод этот прост и дешев, но не очень точен — есть высокий риск ложноотрицательного результата. Результат анализа выдается через 5–7 дней и обозначается в бланке цифровым кодом. 1 — пораженных клеток нет, 2 — обнаружены клетки, измененные из-за воспалительных процессов, 3 — результат вызывает сомнения, необходимо дополнительное обследование, 4 или 5 — наличие пораженных клеток.
Гистологическое исследование
обычно назначают в дополнение к цитологическому. Это лабораторный метод исследования биоптата, то есть маленького фрагмента тканей. Специалист рассматривает препарат в микроскоп и оценивает состояние пораженных клеток. Гистологическое исследование дает возможность определить характер новообразования и отличить кондилому от опухоли. Обычно результат можно получить на руки через 3 дня.
Как правило, после гистологического анализа назначают ПЦР-анализ.
ПЦР-диагностика
— один из самых достоверных способов диагностики, который применяется для выявления многих бактерий и вирусов. При помощи ПЦР-диагностики можно выявить ДНК вируса даже в том случае, если количество возбудителя в крови крайне мало и он никак себя не проявляет. Точность метода приближается к 100%, однако на нее сильно влияет соблюдение техники проведения исследования. Поэтому ПЦР-анализ лучше проводить только в тех лабораториях, где строго следят за соблюдением всех стандартов. Материалом для исследования чаще всего становится мазок, но иногда исследуют околоплодные воды, мочу или кровь. Результаты исследования будут готовы через 1–2 дня, в некоторых случаях их можно получить даже в день обращения, поскольку само исследование как таковое занимает всего 4–5 часов.
ПЦР позволяет очень точно определить количество вируса в биоматериале. Конечная цифра обозначает количество геномных эквивалентов на 100 тысяч клеток. Если вирус вообще не обнаружен, то в бланке это будет указано. Если же вирус присутствует, в результатах обозначат его концентрацию.
- Lg < 3 — вирус ВПЧ есть, но его концентрация крайне мала.
- Lg 3–5 — клинически значимое количество вируса.
- Lg > 5 — высокая вирусная нагрузка.
Если любое из этих исследований даст положительный результат, врач, скорее всего, направит вас на повторный анализ. При современных методах лабораторных исследований риск ошибки низкий, однако ненулевой. Чаще всего ложноположительный результат бывает следствием загрязнения биоматериала и нарушения техники его забора, неправильно выбранного времени для исследования (например, вы прошли лечение и вирус был уничтожен, однако его следы в биоматериале еще можно обнаружить) или несоблюдения пациентом правил подготовки к анализу.
У пациентов вызывает много вопросов неоднозначная ситуация, при которой папилломы есть, тем не менее анализы не выявляют самого вируса. Так бывает, если в какой-то момент в прошлом вирус был активным и привел к формированию кондилом и папиллом, однако впоследствии иммунная система окрепла и подавила его деятельность. Но папилломы не могут рассосаться сами собой. В таком случае наилучшее решение — просто удалить папилломы и не забывать регулярно проходить обследование.
Исследуемый биоматриал
Основной биоматериал для проведения анализа на вирус папилломы человека — клетки эпителия, полученные методом мазка из уретры у мужчин и из цервикального канала — у женщин. Технически для проведения ПЦР-анализа возможно исследование крови, выделений из влагалища и уретры, околоплодных вод и мочи, однако на практике эти типы биоматериала практически не используются.
Для проведения гистологического исследования необходим биоптат, маленький образец тканей из пораженного участка, который отщипывают специальным прибором.
Правила забора биоматериала
Мазок берут при помощи миниатюрной мягкой щетки-ершика, напоминающей щеточку от туши для глаз. Раньше для этой цели использовалась так называемая ложка Фолькмана — крошечная ложка на очень длинном тонком черешке, однако сегодня данный инструмент почти никто не использует.
Щеточку осторожно вводят в канал и вынимают вращательным движением. На ворсинках остаются клетки эпителия. После этого щеточку помещают в специальную стерильную емкость и отправляют на исследование.
Для того чтобы результат анализа был точным, к забору мазка нужно подготовиться. За 2 суток для проведения исследования нельзя вступать в половые контакты, пользоваться антибактериальным мылом для интимной гигиены, проводить спринцевание. Если мазок берется из уретры, забор биоматериала производится до мочеиспускания. Перед забором мазка желательно принять душ без моющих средств.
На результат могут повлиять такие факторы, как прием антибиотиков, пробиотиков и местных антисептиков. Если за последние два месяца вы принимали какие-либо препараты, обязательно предупредите врача об этом.
Забор биоптата из шейки матки — дело гораздо более серьезное. Как и при заборе мазка, за 2 дня до биопсии нельзя вступать в половые контакты, спринцеваться, пользоваться любыми местными антибактериальными средствами и тампонами. После биопсии как минимум 2–3 недели нельзя вступать в половые контакты, при кровотечении разрешено пользоваться только прокладками, но не тампонами. Запрещены существенные физические нагрузки, перегрев, купание в бассейне или открытом водоеме, любые препараты, разжижающие кровь (в том числе обычный аспирин) и любые вагинальные средства — гели, спреи, свечи и т.п.
Где можно сдать биоматериал на анализ
Все описанные выше диагностические методы широко распространены, и сдать анализ на папилломавирусную инфекцию у женщин и мужчин можно практически в любой коммерческой или муниципальной лаборатории.
Многие люди предпочитают заплатить, чтобы избежать общения с государственными медучреждениями — и это их право. Впрочем, следует сказать, что, несмотря на явный недостаток комфорта и неудобство для пациентов, муниципальные поликлиники и диагностические центры в крупных городах прекрасно оснащены, и врачи, работающие там — специалисты высочайшего класса. Что, увы, не отменяет очередей, бюрократии и неудобного графика работы.
Если вы предпочитаете сдать анализ на вирус папилломы человека в частном медцентре, выбирайте крупное и известное учреждение, имеющее собственную лабораторию — это гарантия точности и соблюдения всех правил забора и обработки биоматериала. И, кроме того, в серьезных диагностических центрах результат можно получить быстрее, чем в маленьких компаниях. Небольшие центры часто отдают материал на исследование в сторонние лаборатории, с которыми сотрудничают на условиях аутсорса, а это заметно замедляет получение результата.
Сколько стоит исследование на выявление папилломавирусной инфекции
Стоимость исследования зависит и от уровня медицинского центра, и от его расположения. Мы приведем лишь средние для Москвы цены на анализы на вирус папилломы человека.
Кольпоскопия обойдется приблизительно в 700–1500 рублей. Цитологическое исследование стоит около 1100–2500 рублей, к этой сумме нужно прибавить стоимость забора мазка — 300–600 рублей.
Гистологическое исследование стоит 2000–3000 рублей, а забор биоптата — около 400 рублей.
Стоимость ПЦР-анализа на вирус папилломы человека с определением типа в московских лабораториях составляет 700–1900 рублей.
Сдавать анализ на вирус папилломы человека нужно регулярно, начиная с 20–25-летнего возраста. Особенно это касается женщин — не выявленный вовремя ВПЧ может привести к проблемам с зачатием, бесплодию, невынашиванию, дисплазии шейки матки и появлению злокачественных новообразований. Проходить обследование нужно раз в три года. Если вы входите в группу риска — то есть курите или употребляете алкоголь в больших количествах, часто меняете половых партнеров и болеете инфекционными заболеваниями — обследование должно проводиться раз в год.
Источник